一抗,二抗如何选择?

发布网友发布时间：2022-04-27 09:06

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热心网友时间：2023-09-16 17:14

如果一抗为多克隆抗体，由于多克隆抗体主要是IgG类，因此相应的二抗应该选择抗IgG抗体。

对于一抗为单克隆抗体的情况，其同型(Isotype)通常会在产品信息中给出，如果你的一抗同型是小鼠IgM(Isotype：IgM)，那么相应的二抗就应该选择抗小鼠IgM。

此外由于抗IgG抗体可以识别大多数类型的免疫球蛋白，所以在不清楚一抗同型的情况下，可以选择抗IgG的二抗。

如果单克隆一抗为小鼠IgG的某一亚类，那么除了选择抗IgG的二抗外，还可以选择针对该亚类的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。如一抗同型为小鼠IgG1，那么可以选择抗IgG二抗或抗IgG1二抗。

扩展资料：

注意事项：

1、一般来讲，耦联到二抗上的探针主要有酶（辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），荧光基团（FITC,RRX,TR,PE）和生物素。

2、对于westernblot和ELISA，最常用的二抗是酶标二抗，而细胞或组织标记实验（细胞免疫化学，组织免疫化学，流式细胞术）中通常使用荧光基团标记的二抗，免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号，可以使用biotin/avidin检测系统。

3、亲和层析纯化的抗体一般更受用户欢迎，因为这些产品的纯度最高，产生的非特异性背景最少。但是有些情况下也要考虑到纯化过程中损失的IgG部分，因为其中含有亲和力很高的抗体，尤其是当目的抗原存在的量很小的时候，高亲和性的IgG部分就显得尤为重要。

参考资料来源：百度百科-一抗二抗

热心网友时间：2023-09-16 17:14

虽然是鸡的细胞，但根据中心法则知道，蛋白质的序列信息来自于基因，而你要看的这个基因是猪的序列，所以蛋白质也是猪的序列，因此要使用抗猪的一抗，譬如鼠抗猪，或兔抗猪等等，而二抗则要根据一抗进行选择，一抗用了鼠抗，那么尔康就要用抗鼠的，譬如羊抗鼠；一抗用了兔抗，二抗就要用抗兔的，譬如羊抗兔，而二抗一般都有商品化的试剂，都是IgG，结合的是一抗的Fc段，在购买时必须看清楚是secondary antibody. 你明白了么？