发布网友 发布时间:2022-04-28 18:04
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热心网友 时间:2022-06-22 18:34
Ki67是一种增殖细胞相关的核抗原,其功能与有丝*密切相关,在细胞增殖中是不可缺少 ,但其确切机制尚不清楚,Ki67作为标记细胞增殖状态的抗原。免疫组化时一般用于检测细胞增殖程度。热心网友 时间:2022-06-22 18:35
kI67是一项反应细胞增生能力的指标,所有细胞增生能力提高的情况,如肿瘤、炎症、修复等反应性情况,Ki-67都会升高。那么,免疫组化ki67多少正常呢?接下来为大家解答一下。热心网友 时间:2022-06-22 18:35
Ki67,在很多肿瘤病理中它是判断肿瘤细胞增殖情况的一个指标,越高表示正在肿瘤细胞增殖多,恶性程度越高。
1、【免疫组化】
免疫组化,免疫组织化学技术(immunohistochemistry),是一项利用抗原抗体反应,通过使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原,对蛋白定位,定性的实验技术。
免疫组化主要用的是组织标本和细胞标本两大类,组织标本包括石蜡切片(病理切片和组织芯片)和冰冻切片。石蜡切片,对组织形态保存好,保存时间也长,虽然对组织抗原暴露有影响,但可以抗原修复,所以石蜡切片仍然是首选的标本制作方法。
2、【免疫组化的步骤】
(1)4%多聚甲醛常规灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中过夜。蜡块制作。切片,贴片。0.01MKPBS清洗5min×3后;
(2)加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%过氧化氢)30min,以消除内源性过氧化物酶的影响,0.01MPBS清洗5min×3;
(3)加入配好的0.3% Triton X100(30% Triton X100+0.01MKPBS 100ml)30min,以增加细胞的通透性,0.01MKPBS清洗5min×3;
(4)加入用血清稀释液(牛血清白蛋白1.00g+0.01MPBS 100ml+叠氮纳0.08g)稀释的一抗,4℃存放24-48h;吸去抗体,0.01MKPBS洗5min×3;
(5)加入0.01MKPBS稀释的的二抗,室温孵育2h。0.01MKPBS洗5min×3;
(6)加入ABC复合物之类的抗体,室温孵育2h,0.01MKPBS洗5min×3;蒸馏水迅速冲三次;
(7)加入显色液,进行免疫组织化学显色,时间一般不超过30min,可不时在显微镜下进行观察,待细胞着色而背底颜色较淡时马上吸去显色液,用蒸馏水迅速冲三次后加入0.01MKPBS终止反应;
(8)梯度酒精脱水之后,封片,拍照。
热心网友 时间:2022-06-22 18:36
ki67作为标记细胞增殖状态的抗原,10%弱阳性说明癌细胞增殖不活跃,发展速度较慢,预后较好。