启动子PCR
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发布时间：2022-04-29 21:28
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热心网友
时间：2022-06-04 16:52
展开1全部1 按照教科书上的要求，PCR的退火温度应该为TM-5度，不过有时稍高点也可以，不过你得温度明显过高！试试降低温度。
引物的TM 值太低了，最好重新设计引物，将TM值稍微高点，不然在以genome这样的复杂模板中很易非特异扩增。
2 可能你扩的片段过长，可以用重组PCR，先分成两段扩，再变性后放在一起退火，再扩一轮！
启动子PCR?
启动子是RNA 聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA 序列，它含有RNA 聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列，多数位于结构基因转录起始点的上游,启动子本身不被转录。
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启动子PCR
1 按照教科书上的要求，PCR的退火温度应该为TM-5度，不过有时稍高点也可以，不过你得温度明显过高！试试降低温度。引物的TM 值太低了，最好重新设计引物，将TM值稍微高点，不然在以genome这样的复杂模板中很易非特异扩增。2 可能你扩的片段过长，可以用重组PCR，先分成两段扩，再变性后放在一起退...
克隆启动子pcr循环数一般多少
一般25。这个看你模板的浓度以及目的了。如果是鉴定，25循环就够了。如果是要纯化后连接或者测序，可以适当增加。没有规定，只要目的条带清晰可见就行，可以根据预实验来确定。过多的循环数会导致碱基错配，过少循环导致产物太少不利于测序。
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克隆启动子pcr循环数一般多少
一般25。这个看你模板的浓度以及目的了。如果是鉴定，25循环就够了。如果是要纯化后连接或者测序，可以适当增加。没有规定，只要目的条带清晰可见就行，可以根据预实验来确定。过多的循环数会导致碱基错配，过少循环导致产物太少不利于测序。
