基因的过表达,和敲低都需要载体才能转到细胞里吗

不可。过表达和敲低，是针对基因的表达量进行拷贝数的增加或是降低，通过过量的表达富集和低量的显著减少，来查看因蛋白量的多少对细胞行为或功能产生的影响变化。共培养概念要搞清楚，共培养是2种或2种以上的细胞生长在同一环境下，显然你这里不会把过表达和敲低的细胞放在一个培养皿培养。至于需要做...

结论是，稳定细胞株构建技术通过将外源基因整合到具有抗性的载体或利用慢病毒感染方法，实现基因的过表达、敲入、敲低等操作，构建出多克隆或单克隆的稳定表达细胞系。枢密在这一领域拥有丰富经验，主要应用在构建具有报告基因的细胞系、基因过表达、基因沉默以及基因编辑等服务中。具体步骤如下：1. 首先，...

载体构建方法 基因敲低载体常见于siRNA载体（如短干扰RNA序列）和shRNA载体（形成稳定发夹结构），如CRISPRi载体则通过抑制转录实现敲低。基因敲除载体如CRISPR/Cas9载体，利用Cas9酶精确定位和切割基因，以及TALENs和ZFNs载体通过核酸酶切割DNA序列。构建过程中，需根据目标基因特性和细胞类型选择合适的方法...

没有启动子，基因就不能转录。由于细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子，因此原核表达载体所用的启动子必须是原核启动子。

外源过表达可饱和Exportin 5,从而胜过内源小RNA序列。极端的情况下会引起细胞或动物死亡。外源双链转染后，直接进入RISC复合物中，因而绕过了这些陷阱。当然，在需要持久的功能获得或功能丧失时，还需要载体或病毒的稳定表达。稳定的细胞系必须小心地建立，采用病毒滴度测定来避免上述问题。Joshua Mendell（...

在平时，我们要研究某基因的功能只能通过单独敲低/敲除、过表达的方式，而CRISPR screening允许我们同时进行上万个这样的操作，一次搞定基因组范围的基因编辑，确可谓：精准大海捞针。高通量是新时代生物技术的标配，从能一次完成超过5万个基因的PCR（RNA-seq）到细胞谱系追踪（barcoding），在不影响研究精准...

在疾病进展过程中，基底层上皮细胞中与Notch1相关的受体-配体相互作用减弱，而EFNB1-EPHB4相互作用逐渐增强。进一步实验显示，EFNB1-EPHB4相互作用对细胞增殖、细胞周期和EMT进程有显著影响。通过敲低和过表达EFNB1或EPHB4，研究人员观察到细胞增殖速度的变化，以及细胞周期和EMT进程的调整。EFNB1-EPHB4...

凡是做分子机制的研究，必做分子（mRNA/lnc/circ/miRNA/piRNA ...）的过表达敲低实验，观察细胞/动物表型改变，说明分子的功能。那么我们要找该分子的下游调控通路，比如该分子调控了下游哪个分子，通过哪个信号通路呢？    确定表型有改变的，而...

使用两种以上的siRNA并在两种以上细胞系中进行敲低实验的目的是为了增加结果的可靠性和鲁棒性。具体来说，这么做有以下原因：1、siRNA的特异性：尽管siRNA是特异性较高的靶向剂，但它们的靶向效果仍然可能存在某些限制，如不同转录本的剪接变异等。因此，使用两种或更多的siRNA可以增加靶向效果，避免单一...

敲低。在实验室常用的基因敲低技术有三种，分别是shRNA，siRNA和CRISPR/Cas系统，因此sh是敲低技术，而且shRNA序列对HeLa细胞生长的抑制作用与其敲低效果成正相关。