培养酵母菌的实验怎么做?急!
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发布时间：2022-04-23 00:53
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时间：2022-04-28 01:09
实验前的思考 人类认识和利用酵母菌的历史悠久，早在史前时期，先人们就学会酿酒。约在6000年前，就发明发面的方法。直到十九世纪有了显微镜，人们才窥探到醉母菌的真面目。对酵母菌做纯系培养分类研究的是与巴斯德同时代的丹麦人汉斯，他是为寻求酿造高品质啤酒的途径才去深入研究酵母菌
目的要求
认识酵母菌的形态结构和出芽生殖。
酵母菌的利用。
材料用具
酵母菌培养液，显微镜，解剖针，载玻片，盖玻片，吸管，镊子，稀释的碘酒，吸水纸（或白纸），放大镜，纱布。
方法步骤
一 酵母菌的利用
1查阅酵母菌的利用相关资料：属真菌。体呈圆形、卵形或椭圆形，内有细胞核、液泡和颗粒体物质。通常以出芽繁殖；有的能进行二等分*；有的种类能产生子囊孢子。广泛分布于自然界，尤其在葡萄及其他各种果品和蔬菜上更多。是重要的发酵素，能分解碳水化合物产生酒精和二氧化碳等。生产上常用的有面包酵母、饲料酵母、酒精酵母和葡萄酒酵母等。有些能合成纤维素供医药使用，也有用于石油发酵的。啤酒酵母属酵母菌属。细胞呈圆形、卵形或椭圆形。以出芽繁殖，能形成子囊孢子。在发酵工业上，可用来发酵生产酒精或药用酵母，也可通过菌体的综合利用提取凝血质、麦角固醇、卵磷脂、辅酶甲与细胞色素丙等产品。
2联系实际，参观沙湾啤酒厂，获得酵母菌，麦芽，带回准备试验
二、观察酵母菌
1．取一滴酵母菌培养液，制成临时装片。用显微镜观察酵母菌的形态和颜色。
2．用稀释的碘酒染色，观察酵母菌的细胞壁、细胞核、细胞质和液泡。
3．画一个正在进行出芽生殖的酵母菌，注出芽体。
三 酵母菌的扩培
3 菌种和培养基
3.1 菌种：啤酒酵母
3.2 培养基
3.2.1 酵母斜面培养基
10°麦芽汁固体斜面，pH5.0
3.2.2 酵母摇瓶种子培养基
10°麦芽汁，pH5.0或葡萄糖10%，玉米浆1%，尿素O.2%，pH5.0。
3.2.3 酵母分批发酵培养基
玉米粉经液化、糖化，折合葡萄糖浓度为10%，玉米浆1%，硫酸铵0.4%，pH5.5。
3.2.4酵母分批补料发酵培养基(学生讨论提出)
4 实验仪器、设备
（1）5升发酵罐；
（2）摇瓶机或手摇；
（3）超净工作台；
（4）离心机
（5）显微镜
（6）分光光度计
（7）三角瓶。
5 实验过程
5.1 分批培养
5.1.1 总流程
斜面培养 斜面培养基配制与灭菌，接种，培养
↓ 所需仪器物品：灭菌锅，试管，棉塞，培养基原料，培养箱
摇瓶种子 300毫升种子液，500ml三角瓶三只。装液100ml，培养基，培养摇瓶，纱布。
↓
上罐培养 (双酶制糖)糖化液稀释至l0%浓度，添加辅料，灭菌，接种。
↓
菌体分离 离心机或板框过滤器
5.1.2 斜面种子制备
自保藏斜面中挑取一环酵母菌体接入新鲜的斜面试管中，于28℃培养箱中培养24h。
5.1.3 摇瓶种子的制备
将上述培养好的斜面种子接入500ml三角瓶装的灭过菌的100ml摇瓶种子培养基中，在28℃，200rpm震荡培养15-20h。
5.1.4 发酵罐培养
5升发酵罐装入2升发酵培养基，121℃灭菌20min，冷却至30℃，将培养好的摇瓶种子接入发酵罐（接种量2~3%）进行发酵。发酵条件为：温度28℃，
5.1.5 过程监控
0小时：取样测定总糖和还原糖；
4~24小时：每隔4小时取样镜检、、菌体浓度；
6 实验时间
三天
7 实验分析项目和方法
（1）酵母镜检；
（2）酵母浓度测定(湿重法)：吸取5ml菌液，2500rpm离心5min，去上清液，称量菌体湿重
（3）发酵活力的测定
8 实验报告内容和数据处理
9 实验结果和讨论
。
补充：5升发酵罐可用玻璃器皿代替，
