证明小分子和蛋白相互作用的方法能不能用pull down

发布网友发布时间：2022-04-22 23:58

共3个回答

热心网友时间：2023-06-26 14:02

GSTpull-down一般指用一个带GST标签的重组蛋白，与目的蛋白进行孵育，最后用结合GST的Beads拉下相互作用复合物。免疫共沉淀一般是用某一蛋白的抗体，在细胞裂解液中与相应的蛋白结果，用ProteinA/G将抗原抗体复合物拉下，最后在拉下的复合物中检测目的蛋白的实验。二者都是用于检测蛋白相互作用的实验。区别是pull-down一般是验证体外相互作用；免疫共沉淀一般用于检测细胞水平的体内相互作用。

热心网友时间：2023-06-26 14:02

不一定是直接相互作用,也有可能是多个蛋白质分子形成了一个复合物,而这种情况用GST pull down是没法和蛋白直接相互作用区分的.
另外,GST pull down 是可以研究生理状态下的蛋白相互作用的.

热心网友时间：2023-06-26 14:03

可以的呀,这通常叫做affinity pull-down。将小分子与resin固定在一起，样品（一般是细胞裂解液）淋洗，这样小分子就可以捕捉到与之结合的目标蛋白。