免疫沉淀的实验步骤

发布网友发布时间：2022-04-22 23:58

共1个回答

热心网友时间：2023-07-21 05:02

（1）收获细胞，加入适量细胞IP裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上或者4℃裂解30min,
12,000g离心30
min后取上清；
（2）
取少量裂解液以备Western
blot分析，剩余裂解液将1μg相应的抗体和10-50
μl
protein
A/G-beads加入到细胞裂解液，4°C缓慢摇晃孵育过夜；
（3）免疫沉淀反应后，在4°C
以3,000
g速度离心5
min,将protein
A/G-beads离心至管底；将上清小心吸去，protein
A/G-beads用1ml裂解缓冲液洗3-4次；最后加入15μl的2×SDS
加样缓冲液，沸水煮10分钟；
（4）SDS-PAGE,
Western
blotting或进行质谱分析。

声明：本网页内容为用户发布，旨在传播知识，不代表本网认同其观点，若有侵权等问题请及时与本网联系，我们将在第一时间删除处理。E-MAIL:11247931@qq.com