发布网友 发布时间:2022-04-22 12:10
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热心网友 时间:2023-11-04 02:32
酶分子中直接与底物结合,并催化底物发生化学反应的部位,称为酶的活性中心。它是由*结构中空间位置相邻的几个氨基酸共同构成的。
酶的活性中心包括两个功能部位:一个是结合部位,是酶与底物结合的基团,决定酶的专一性;另一个是催化部位,催化底物敏感键发生化学变化的基团,决定酶的催化能力。但这两个部位并不是各自独立存在的,相互联系。
鉴定方法
1、化学修饰法
观察酶分子被一定的化学试剂修饰前后酶活性的变化情况,结合其它方法,推断该基团是否为活性中心的功能基团。
如胰凝蛋白酶与二异丙基氟磷酸(DIFP)作用即会失去活性。DIFP能与酶分子中的Ser残基共价结合,胰凝乳蛋白酶中有28个Ser残基,而与DIFP作用的仅仅是其中的Ser195。这表明Ser 195是胰凝乳蛋白酶活性中心的组成部分。
2、亲和标记法
使用一个能与酶的活性中心特异结合的正常底物类似物作为活性部位基团的标记试剂。该类似物不能为酶所催化而发生化学反应,却能与酶的特定基团发生共价结合使酶失活。
如N-对-甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲基酮(TPCK)是胰凝乳蛋白酶的亲和标记物,当用C14标记的TPCK与胰凝乳蛋白酶一起保温时,酶即失活。
以上内容参考:百度百科-酶的活性中心