免疫组化中一抗与二抗有什么要求?谢谢!
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发布时间:2022-04-23 06:24
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热心网友
时间:2022-05-31 17:34
比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊,兔,马等。一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记。
条件允许尽量选择进口,一抗abcam,Santa,CST等值得信赖,二抗的话国产的就行了。
源性一抗如果需要做共定位,那么就需要不同源性的且要能够用于人组织的,可以做组化的,二抗建议选择驴抗,这样用处多;如果说是做组织化学,那么一抗源性就无所谓了只要能用于人的组织,二抗相应配套就行。
扩展资料:
抗体选择没问题,关于二抗你直接购买国产的二抗试剂盒就可以了,如中杉金桥或者博士德的都没问题,里面封闭用的过氧化氢和山羊血清都有的。按照试剂盒说明,一步一步做即可。
免疫荧光,ABC,western blotting一抗应该可以通用,
某些抗体的说明书上会给推荐效价,有时会同时给出western blotting 和免疫组化的效价。
一点更正:
免疫荧光就是一种免疫组化方法!免疫荧光使用的是荧光抗体(荧光一抗为直接法,普通一抗加荧光二抗为间接法)。
免疫组化的二抗必须是抗一抗物种的抗原,比如说:做A动物的B蛋白所用的一抗为动物C抗动物A的B蛋白抗体,二抗就应该是动物D抗动物C抗体。
如:豚鼠抗大鼠cofilin1一抗,羊抗豚鼠二抗。二抗远比一抗便宜。
参考资料来源百度百科——免疫组化
热心网友
时间:2022-05-31 17:35
当然有.
比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的.×表示可以是羊,兔,马等.
一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记.
热心网友
时间:2022-05-31 17:35
当然有。
比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊,兔,马等。
一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记。
热心网友
时间:2022-05-31 17:36
一抗是鼠源的,那二抗必须是×抗鼠的,如羊,马等。
而且,你做组化时上抗体之前要先用封闭液封闭,以排除非特异性的染色,所以你用羊抗鼠的二抗,就应该用羊血清封闭;如果用马抗鼠的二抗,就应该用马血清来封闭。总之要和你的封闭液对应好。
热心网友
时间:2022-05-31 17:37
一抗如果是鼠抗人的抗体,二抗应该是另一种动物抗鼠的抗体,而且以抗和二抗的动物种属原则上不应该相同。一般来说,一抗多用兔抗和鼠抗,而二抗多用羊抗。
单克隆抗体是指针对于抗原标志物上某一种抗原决定簇产生的单一种类的抗体,一般通过杂交瘤细胞技术制得;多克隆抗体是指针对抗原上多个抗原决定簇产生的抗体,一般将抗原免疫动物血清直接制得。对于一抗来说,现用单克隆抗体较多。
相对于一抗的特异性,二抗要求广谱抗体,最好能够一对多。现在购买的二抗多是二抗加亲和素生物素的复合物,与传统二抗有所不同。至于封闭液的问题,其实就是用与二抗相同种属动物的非免疫血清封闭阻断非特异性蛋白,可以视所作标本中蛋白的特异性做或不做。一般可以和二抗成套购买。
免疫组化中一抗与二抗有什么要求?谢谢!
比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊,兔,马等。一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记。条件允许尽量选择进口,一抗abcam,Santa,CST等值得信赖,二抗的话国产的就行了。源性一抗如果需要做共定位,那么就需要不同源性的且要能够用于...
请问免疫组化如何正确选择和使用二抗
1 种属来源要匹配:根据所用一抗选定二抗。一般来说,如果一抗是小鼠源性,二抗应选择兔/山羊或其它种属抗小鼠的抗体。目前,美国Vector公司和 Zymed公司都有开发的用小鼠抗体检测小鼠组织的试剂盒,即一抗来源于小鼠,该试剂盒采用了通用非特异性封闭液和专利封闭内源性小鼠Ig的封闭液,可以 得到清晰...
免疫组化中二抗指什么
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要...
免疫组化一抗用什么稀释?PBS可以吗?
建议用血清稀释,最理想的方法是用二抗同种属的血清,如二抗是山羊的,用山羊血清,或者是用2%BSA,前提是一抗不是牛的。也就是说,一抗是羊的,小鼠的,兔子的,都可以用BSA。
免疫组化为什么要用一抗又要用二抗啊
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西.一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗...
ELISA如何选一抗与二抗
二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类(IgG1,...
免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求啊
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SP免疫组化中什么是一抗?谢谢!
~~~你确定一抗主要有三点:一是特异性识别你所要检测的蛋白质,二是经生产商测试适用于免疫组化实验 三是如果你已经买好了二抗,确实你的一抗能够被二抗所识别 顺便说下,做血细胞的话用免疫组化有些怪,难道你用的是淋巴组织切片么?如果是单个细胞的话用流式细胞仪看免疫荧光比较好。参考资料:...
如何选择一抗,二抗!如何选择实验需要的抗体!最优回答!
(1)种属来源。主要根据一抗种属来源而决定二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。(2)标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。免疫组化,WB二抗主要选择HRP,Biotin标记的二抗,而免疫荧光染色可按实验需要选择不同荧光素标记的二抗,如FITC、Cy3、PE等。详...
一抗,二抗如何选择?
如果一抗为多克隆抗体,由于多克隆抗体主要是IgG类,因此相应的二抗应该选择抗IgG抗体。对于一抗为单克隆抗体的情况,其同型(Isotype)通常会在产品信息中给出,如果你的一抗同型是小鼠IgM(Isotype:IgM),那么相应的二抗就应该选择抗小鼠IgM。此外由于抗IgG抗体可以识别大多数类型的免疫球蛋白,所以在不...