野生型基因的对于结肠腺癌细胞系的效果和作用
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发布时间：2022-11-07 07:25
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时间：2023-11-01 15:55
野生型K-ras基因是一个信号传导下面重要的路径，就是说必然要通过这个途径来进行肿瘤信号往下传，传完以后肿瘤细胞才能增值、分化、生存，如果传不下来了信号下不来了，就没有生存能力了，没有繁殖能力了，就要死掉。它在结直肠癌进展方面起到重要作用，它也是一个关键的基因，是通过EGFR下传途径的关键基因。
KRAS基因检测可以在患者中通过特殊的基因分析来筛选有效的人群，从而能够更有效的开展个体化治疗。 肿瘤细胞的生长、增殖、血管生成等过程都需要细胞内的传导蛋白进行信号传导， KRAS基因是编码传导蛋白的一个重要基因,也就是在传导通路中起着重要作用，因而能够影响肿瘤的生长和扩散。
KRAS基因可以是没有发生突变的正常状态（称为野生型，占60%左右）或发生突变的异常状态（突变型，占40%左右）。在KRAS野生型转移性结直肠癌中，EGFR靶向药物西妥昔单抗（爱必妥）能有效阻止信号传导，从而抑制肿瘤细胞生长。而KRAS基因如果发生突变，就会刺激促进恶性肿瘤细胞的生长和扩散；并且不受上游EGFR的信号影响，影响西妥昔单抗（爱必妥）的治疗效果。
为观测野生型Kras2基因对于结肠腺癌细胞系Caco-2的生长抑制效应，研究人员构建重组质粒pCI-neo-Kras2与野生型Kras2基因开放阅读框架，采用Lipofectamine 2000将Caco-2细胞转染pCI-neo或pCI-neo-Kras2，根据Northern blot分析野生型Kras2的表达情况，并根据Western blot分析检测野生型Kras2蛋白的表达情况，采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析野生型Kras2对于细胞增生的影响，同时采用流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和自发性凋亡率。结果可见，成功建立pCI-neo-Kras质粒。pCI-neo-Kras2转染细胞的增殖率显著低于转染空pCI-neo载体的对照细胞(P
