培养基的配制有哪些?

发布网友发布时间：2022-04-23 03:17

共3个回答

懂视网时间：2022-08-31 17:40

1、配制用水

培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的

双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。

2、培养基

培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。

3、血清

培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。

4、抗菌素

为防止培养时期细菌的污染，可在培养基中添加适当抗菌素，一般用量与组织细胞培养相同：卡那霉素100单位/毫升，或双抗--青霉素100单位/毫升，链霉素100微克/毫升。

5、植物血凝素（PHA）

非增殖期的细胞不能制备染色体，如人外周血淋巴细胞，但在离体培养过程中，在PHA的作用下，可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。

经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。

PHA有粘多糖，蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂，蛋白质起凝集作用。PHA激活的细胞数随其浓度而增加，直至全部免疫活性细胞均

被激活为止，但PHA浓度过高会引起凝集，一般采用4%浓度为好。

热心网友时间：2023-07-03 10:33

1.培养基

培养基的种类较多，常常是不同种的植物要求的培养基成分不同。根据培养植物，选用适宜的培养基。现将常用的几种培养基组成介绍给读者，供参考。

（1）MS培养基

（2）White培养基

（3）Vacin and Went（VW）培养基

（4）Kundson C（KC）培养基

2.培养基母液的配制和保存

经常配制培养基，为减少工作量及便于低温贮藏，一般配成比所需浓度高10～100倍的母液，配制培养基时只要按比例量取即可。配好的母液需装在棕色小口瓶中，存放在0～4℃冰箱中可使用半年至1年。如发现有沉淀物则不可再用，需重新配制。MS培养基母液配制如下：

3.培养基的配制过程

将母液从冰箱中取出，依次排好，按需要定量吸取，放入量筒中。称取琼脂，加少量水后加热，并不断搅拌，直到全部溶化。再加入称好的糖和前面备好的各种成分，不断搅拌，使之充分混合。测定已配好的培养基氢离子浓度（酸碱度），用0.1～1.0摩尔/升（0.1～1.0摩）氢氧化钠和盐酸将培养基调至所需的浓度。

将配好的培养基分别灌注到培养瓶中（试管或三角瓶），用盖子（棉塞、橡胶塞、铝箔）将瓶盖好，外面再包一层牛皮纸，标明编号。

培养基通常用高压灭菌锅灭菌。气压111.46～121.59千帕（1.1～1.2千克/厘米2压力），10～20分钟。冷却备用。

热心网友时间：2023-07-03 10:34

为了使食用菌能正常生长发育，培养基除了必须有足够的碳、氮营养外，还应注意碳与氮的比例（碳氮比，C/N）。这样既能保证营养生长阶段对营养的需要，也能保证生殖生长的顺利进行。例如，巴西蘑菇培养料适宜的碳氮比（C/N）为28～30∶1，含氮量1.4%～1.6%，投料量30～35千克/米2。我们可以按照培养料主要物料的碳氮比（详见附录4）设计配方。

热心网友时间：2023-07-03 10:35

不是啊
用灵敏度为0.1mg的天平称取药品.
（2）
往烧杯加入适量蒸馏水或无菌水.
（3）
将药品放入烧杯内,并用玻璃棒搅拌使其溶解,难溶时可适当加温以加速溶解.
（4）
要待一种药品完全溶解后再加入下一种药品.
（5）
所加入的药品应依次加入，直至药品全部加入溶解为止。
例
ms母液的配制
按ms培养基成分表，将各种化学物质归成几大类，分别为大量元素、微量元素、铁盐、有机物。
大量元素10倍液(mg/l)
微量元素1000倍液（mg/l）
有机物100倍液（mg/l）
铁盐
nh4no3
1,6500
kno3
1,9000
cacl2?2h2o
4,400
mgso4?7h2o
3,700
kh2po4
1,700
hbo3
6,200
mnso4?4h2o
22,300
znso4?7h2o
8,600
ki
830
na2moo4?2h2o
250
cuso4?5h2o
25
cocl2?6h2o
25
甘氨酸
200
肌醇
10,000
烟酸
50
维生素b6
50
维生素b1
40
5.57g
fes04?7h2o和7．45g
na2一edta溶于1升蒸馏水里，用时每配1升ms培养基取5ml。
取烧杯注入约600ml蒸馏水,按顺序加入药品并使其溶解,最后加蒸馏水定容至1000ml。
取烧杯注入约600ml蒸馏水,按顺序加入药品并使其溶解,最后加蒸馏水定容至1000ml。
2．
培养基制备
配制流程见图1-2，其顺序是：
①
取烧杯或三角瓶注入一定量的蒸馏水，将各种母液按所需容积分别用移液管吸取并混合在一起，然后按要求加入一定量的激素、蔗糖后定容至一定体积。
②
用1mol/l的naoh或hcl调节ph
③
如制固体培养基，则加入1%左右的琼脂后加热煮沸，使其熔化。
④
分装，可用漏斗将液状培养基注入培养瓶，注入量视培养瓶容量大小而定，通常为容器的1/5左右。
⑤
封瓶口。
⑥
高压蒸汽灭菌。120℃，1.5mpa,消毒15～20min。注意压力不能太大，时间也不宜过长，否则蔗糖、有机物特别是维生素类物质会在高温下分解，影响培养基的酸碱度，琼脂也会分解，颜色变深且不易凝固。
⑦
灭菌后的培养基可放入接种室内静置，让其降温后凝固，如需斜面可将其斜放。