啤酒酵母扩培流程要点
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发布时间:2022-10-13 21:43
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时间:2023-11-14 22:05
一、实验目的:
学习酵母菌种的扩大培养方法,为实验室啤酒发酵准备菌种。
二、实验原理:
在进行啤酒发酵之前,必须准备好足够量的发酵菌种。在啤酒发酵中,接种量一般应为麦芽汁量的10%(使发酵液中的酵母量达1×107个酵母/mL),因此,要进行大规模的发酵,首先必须进行酵母菌种的扩大培养。扩大培养的目的一方面是获得足量的酵母,另一方面是使酵母由最适生长温度(28℃)逐步适应为发酵温度(10℃)。
三、实验器材:
恒温培养箱,生化培养箱,显微镜等。
四、实验步骤:
本次实验拟用60升麦芽汁,因此应制备6000 mL含1×108个酵母/mL的菌种,以每班10个组计算,每个组应制备约600 mL菌种。建议流程如下:
菌种扩大: 麦汁斜面菌种→麦汁平板—28℃,2天→镜检,挑单菌落3个,接种 50mL麦汁试管(或三角瓶)—20℃,2天( 每天摇动3次)→550mL麦汁三角瓶—15℃,2天(每天摇动3次)→计数备用。
1. 培养基的制备
取协定法制备的麦芽汁滤液(约400 mL),加水定容至约600 mL,取50 mL装入250 mL三角瓶中,另550 mL至1000 mL三角瓶中,包上瓶口布后,0.05 Mpa灭菌30分钟。
2. 菌种扩大培养
按上面流程进行菌种的扩大培养(斜面活化菌种由教师提供)。注意无菌操作。
五、注意事项:灭菌后的培养基会有不少沉淀,这不影响酵母菌的繁殖。若要减少沉淀,可在灭菌前将培养基充分煮沸并过滤。
六、思考题:菌种扩大过程中为什么要慢慢扩大,培养温度为什么要逐级下降?