请写出以发明者命名的3种分子杂交技术,并指明各自的应用范围,同时写出一种技术的主要过程。
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发布时间:2023-04-23 18:57
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热心网友
时间:2023-11-01 01:44
【答案】:以发明者命名的3种分子杂交技术为:
(1)Soutliern Blotting:特指DNA印迹杂交;
(2)Northern Blotting:特指RNA印迹杂交;
(3)Western blotting:特值蛋白质印迹杂交。
例如:Southern Blotting(印迹法)基本流程:组织或细胞→基因组DNA→*性内切酶酶切→琼脂糖凝胶电泳→印迹转移至滤膜→预杂交→加入探针→杂交→洗膜→放射自显影。[考点]以发明者命名的3种分子杂交技术。(1)Southern Blot:特指DNA印迹杂交,将DNA用*性内切酶酶切后,进行琼脂糖凝胶电泳分离。把定位在凝胶上的不同相对分子质量的DNA用碱变性处理,使其双链DNA分开再把凝胶中变性的DNA转移到纤维素膜上。然后用制备的标记探针与膜充分混合接触,进行DNA杂交。杂交后带有放射性的。DNA留在纤维素膜上,经过放射自显影后,在X光底片上出现黑色区带证实该片段就是目标DN*段。(2)Northern Blotting:特指RNA印迹杂交,与Southern Blotting的区别在于印迹转移的材料为RNA而非DNA。(3)Western blotting:是在蛋白质凝胶电泳和固相免疫测定基础上发展起来的蛋白质检测技术。该技术可用于目的基因表达产物的鉴别和定量,也可检测细胞中某个蛋白的表达水平。其特点是灵敏度很高,可测出样本中1~5ng待测蛋白。