抗体蛋白纯化有什么好的方法?

发布网友发布时间：2023-05-15 05:46

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热心网友时间：2024-12-05 19:01

纯化抗体的方法较多,建议用蛋白A 或蛋白G 微球纯化法作为最常用的方法.这种方法效率高,能为常用的实验方法提供足够纯化的抗体,而且随着商品化的蛋白A,和蛋白G 基质的出现,能将任何来源的抗体纯化.抗体的纯化也可采用传统的色谱法,在某些情况下非常有用.这些方法包括DEAE 离子交换色谱法、硫酸镀沉淀法及其他方法.但是用蛋白G 或蛋白A 亲和柱法纯化较其他方法简单,并且纯化效果是其他方法的数倍.因此在所有方法中,我推荐这种方法.
有一种情况不适于应用蛋白G 或蛋白A 亲和柱纯化抗体,即多克隆抗体需要进一步分离,且针对某种特异性抗原的组分需要分离.此时可用抗原结合的亲和柱纯化抗原恃异性抗体.
原理就是抗原抗体的结合.蛋白A和G被锚定在树脂上,IgA和IgG在过树脂柱子的时候能够被protein A和protein G捕获,留在柱子上,其他的杂蛋白会被洗掉,最后用特殊的洗脱液能够将IgA和IgG纯化下来.原理跟普通蛋白纯化的原理是一样的,只不过吸附介质不一样而已.