求大神讲解一下单克隆筛选的原理,最好通俗一点哈
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发布时间：2022-04-23 13:39
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热心网友
时间：2023-07-15 06:39
细胞单克隆筛选
细胞单克隆筛选是根据细胞所具有的特性将单个细胞从混合的细胞样品中分离出来的一种技术,是抗*备细胞株优化、稳转细胞株构建、药物靶点筛选等应用中重要的一环,优质的单克隆细胞能够更好地为不同领域科学研究和药物研发提供支持。
通俗的讲:就是将混合细胞通过3D打印技术（更精准高效）/直接用96孔板分离，此时一部分目标细胞就与其他细胞分离开来，经过筛选，得到目标细胞进行培养就能得到同种细胞了
热心网友
时间：2023-07-15 06:39
集流式细胞术和微流控技术于一体的新一代细胞分离设备。流式细胞仪的流体聚焦技术能够大大提高检测灵敏度，另外微流控技术使得设备内部的鞘液压力可以降至2psi以下，也无需高频振荡，减少了分选过程对细胞的伤害，提高了分选出来的细胞的活性。另外，一次性芯片实现了细胞分选过程中，样本之间的完全隔离（从加样到分离全都在芯片中完成）。
单克隆筛选工作原理：
单克隆筛选的重要性：
在单抗开发领域中，细胞株的构建关键环节是要筛选高表达细胞的单克隆，这是FDA等监管部门的要求，也是确保抗体药稳定性的重要依据。在以往的细胞株构建环节中，用户往往采用手动的有限稀释法往96孔板中铺细胞。一般他们会按照0.5或者0.3个细胞每孔，进行细胞铺板。按照泊松分布的规律，会有30%-40%的孔中能进去单细胞，其余的孔含有的细胞数为零个或者两个以上。接下来还要观察孔中的细胞生长情况，通常会采用孔板成像设备对细胞生长状态进行跟踪拍照观察，一般会在铺板完成当天也就是第0天，第1天，第3天......进行拍照存档，为后期确定单克隆提供关键证据。
上述手动有限稀进行单克隆筛选，是操作极为简单且成本极低的方式，但是同时效率也是很低的。为了确保更多的孔中铺进去的是单细胞，所以铺板的初始细胞密度不能过高。
