人表皮生长因子的内源性hEGF的提取、化学合成与基因重组hEGF
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发布时间：2022-12-16 20:54
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时间：2023-09-10 17:38
人的尿、血液、乳汁及胃液等中含内源hEGF 大约为50 ng/ mL[10 ] , 且常与EGFR 结合, 因此从自然来源中提取hEGF 相当困难, 仅限用于理论研究。规模生产hEGF 有2 种途径: 一是固相化学合成法, 但因为hEGF 中含3 个二硫键和多种官能团的氨基酸的残基, 所以合成产物纯度与产率不高, 无法工业化生产。另一种方法是利用基因工程技术生产hEGF。基因重组hEGF 的基本策略是首先从cDNA 基因文库中探测并分离出hEGF 目的基因; 其次将目的基因克隆至如pETAC 质粒上, 构建强启动子下的含hEGF 目的基因质粒; 然后将质粒转化至基因工程菌中筛选、培养和表达hEGF，并分离纯化hEGF。产物hEGF 主要存在3 种表达形式: ①是细胞内以融合蛋白形式表达, 鉴于hEGF 在胞内以包涵体形式存在,在分离中需破裂细胞, 导致纯化困难, 且产量低; ②是在细胞周质中表达, 主要是将大肠杆菌( E1coli )的碱性磷酸酶的信号肽与hEGF 基因相连, 最高表达水平为300 mg/ L～400 mg/ L; ③是细胞外表达,主要利用细胞外膜蛋白信号肽基因优化、构建质粒,产物表达水平为0.25 g/ L～1.10 g/ L。胞外分泌型表达是目前最先进的且适于工业化的表达方式。
表皮生长因子（EGF重组人表皮生长因子）的三大难题是怎么突破的
中国科学院遗传研究所研究员汤懋竑教授历经无数次试验，用国际首创的“汤氏芽胞杆菌”对EGF重组人表皮生长因子进行完全表达，生产出结构和生物活性等方面与人体内源表皮生长因子高度一致的高活性（每瓶含30000以上国际单位活性）、真空封存的EGF重组人表皮生长因子冻干粉。 这项高科技生物基因技术成果攻克了困扰科学界40多年的世界难关，实现了EGF重组人表皮生长因子的规模化生产，百胜斯成为世界上最大的EGF重组人表皮生长因子生产基地，其生产技术和规模超过了美国等发达国家，居世界首位。 这种规模化的提取极大的降低了生产成本，彻底解决了影响EGF重组人表皮生长因子推广的三大难题，使EGF重组人表皮生长因子这一荣获诺贝尔奖的成果开始真正走进普通老百姓，应用于大众美容。 烟台康达尔采用了冷冻干燥技术将EGF重组人表皮生长因子制备成冻干粉，配制相匹配的溶媒，有效的解决了EG重组表皮生长因子在常温下易失活的问题。与同类EGF重组人表皮生长因子产品比较，该产品最大的特点是：克服EGF重组人表皮生长因子常温保存不能超过七天的*，可在常温下保存两年。
