灭活补体的标准条件为?

发布网友发布时间：2023-05-17 05:15

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热心网友时间：2023-09-12 09:21

A. 补体灭活对免疫学技术有什么指导意义

使血液制品，特别是血清中的补体失去活性，不灭活补体的血液制品具有溶血作用，通过56度30分钟灭活后，补体失去活性，对细胞就没有破坏作用了。

B. 补体的灭活

补体系统（plement
system）一组存在于人和脊椎动物正常新鲜血清中的非特异专性球蛋白。它与酶属活性有关。
19世纪末，在研究免疫溶菌和免疫溶血反应中，认为这种球蛋白是对抗体的溶细胞有辅助作用的物质，因而得名补体。补体由9种成分组成，分别命名为
c1、c2、c3、…、c9。c1又有
3个亚单位即c1q、
c1r和c1s。除c1q外，其他成分大多是以酶的前体形式存在于血清中，需经过抗原-抗体复合物或其他因子激活后，才能发挥生物学活性作用，这叫做补体的经典激活途径。近20年来，又发现了替代激活途径和其他的一些激活途径，同时也发现血清中的许多其他因子参与这些途径的激活过程，此外，还发现有许多灭活补体的因子。因此，将与补体活性及其调节有关的因子统称为补体系统。目前认为，补体系统是由20多种不同的血清蛋白组成的多成分系统，至少有两种以上的不同激活途径。

C. 补体系统的激活过程

机体通过一系列的复杂的因素，调节补体系统的激活过程，使之反应适度。例如经C3b的正反馈途径即可扩大补体的生物学效应。但补体系统若过度激活，不仅无益地消耗大量补体成分，使机体抗感染能力下降；而且在激活过程中产生的大量行物活性物质，会使机体发生剧烈的炎症反应或造成组织损伤，引起病理过程。这种过度激活及其所造成的不良后果，可通过*机制而避免。这种*机制包括补体系统中某些成分的裂解产物易于自行衰变以及多种灭活因子和抑制物的调节作用。
自行衰变调节
某些补体成分的裂解产物极不稳定，易于自行衰变，成为补体激活过程中的一种自控机制。例如C42复合物中的C2b自行衰变即可使C42不再能持续激活C3，从而*了后续补体成分的连锁反应。C5b亦易于自行衰变，影响到C6-C9与细胞膜的结合。
体液中灭物质的调节
血清中含有多种补体成分的抑制或灭活特定的补体成分。
CI抑制物：CI抑制物（Ci inhibitor，CIINH）可与CI不可逆地结合，使后者失去酯酶活性，不再裂解C4和C2，即不再形成C42（C3转化酶），从而阻断或削弱后续补体成分的反应。遗传性CIINH缺陷的患者，可发生多以面部为中心的皮下血管性水肿，并常以消化道或呼吸道粘膜的局限性血管性水肿为特征。其发生机制是CI未被抑制，与C4、C2作用后产生的C2a(旧称C2b的小片段)为补体激肽，或增强血管通透性，因而发生血管性肿。
CIINH缺陷时，C4、C2接连不断地被活化，故体内C4、C2水平下降；因其不能在固相上形成有效的C42（C3转化酶），所以C3及其后续成分不被活化。因此本病不像C3-C8缺陷那样容易发生感染。
大部分CIINH缺陷病人与遗传有关，另有约15%的病人无遗传史，其CIINH虽有抗原性但无活性（部分可产生正常CIINH，并非完全缺陷）。前者称为I型血管性水肿，后者称为Ⅱ型血管性水肿（Alsenz等，1987）。
血管性水肿可用提纯的CIINH治疗，据称有效，亦可给以男性激素制剂以促进肝合成CIINH，预防水肿的发生。
C4结合蛋白：C4结合蛋白（C4 binding protein, C4bp）能竞争性地抑制C4b与C2b结合，因此能抑制C42（C3转化酶）的形成。
I因子：I因子又称C3b灭活因子（C3b inactivator, C3b INA）能裂解C3b，使其成为无活性的C3bi，因而使C42及C3bBb失去与C3b结合形成C5转化酶的机会。
当遗传性I因子缺陷时，C3b不被灭活而在血中持续存在，可对旁路途径呈正反馈作用，陆续使C3裂解并产生出更多的C3b。因此血中C3及B因子的含量因消耗而降低。当发生细菌*染时，因补体系统主要成分C3和B因子严重缺乏，削弱了抗感染作用，可因条件致病菌惹发严重的甚至致命性后果。
H因子：H因子虽能灭活C3b,但不能使C3bBb中的C3b灭活。H因子（factor H）不仅能促进I因子灭活C3b的速度，更能竞争性地抑制B因子与C3b的结合，还能使C3b从C3bBb中致换出来，从而加速C3bBb的灭活。由此可见，I因子和H因子在旁路途径中，确实起到重要的调节作用。
S蛋白：S蛋白（Sprotein）能干扰C5b67与细胞膜的结合。C5b67虽能与C8、C9结合，但它若不结合到细胞膜（包括靶细胞的邻近的其他细胞）上，就不会使细胞裂解。
C8结合蛋白：C8结合蛋白(C8binding protein,C8bp)又称为同源性*因子（homologousrestriction factor,HRF）。C56与C7结合形成C567即可插入细胞膜的磷脂双层结构之中，但两者结合之前，可在体液中自由流动。因此，C567结合的细胞膜不限于引起补体激活的异物细胞表面，也有机会结合在自身的细胞上，再与后续成分形成C5～9大分子复合物，会使细胞膜穿孔受损。这样会使补体激活部位邻近的自身细胞也被殃及。
C8bp可阻止C5678中的C8与C9的结合，从而避危及自身细胞膜的损伤作用。C8分子与C8bp之间的结合有种属特异性，即C5678中的C8与同种C8bp反应；但与异性种动物的C8不反应，所以又称为HRF。据称C8bp也能抑制NK细胞和Tc细胞的杀伤作用，值得注意。

D. 采用那种方式灭活血清中的补体

补体复结合试验前受检血制清需灭活，常用56℃加热30min。

胎牛血清的灭活，一般是用水浴加热的方式来加热已经完全解冻的血清，那么需要注意的是，加热的过程中一定要规则地将血清摇晃均匀。

而之所以这么做，是为了能够让血清中的补体成分去活化。不过胎牛血清的灭活并不是强制的要求，客户可以自行选择是否进行灭火处理。

(4)灭活补体的标准条件为扩展阅读

Triglia和Linscott曾对商业胎牛血清中的补体成分进行测定，他们发现胎牛血清中含有的C1，C6仅达成年动物血清的1－3％，而其它补体成分仅有成年动物的5－50％，至于补体的主要成分C3在胎牛血清中则几乎不能检出。

Pinyopummintr等证明血清去除灭活步骤不影响牛胚胎的发育分化。又有研究结果证实热灭活步骤减弱了胎牛血清和小牛血清对细胞的促粘附作用。

E. 补体的激活或灭活对整个机体内环境的稳定有何影响

补体的激活或灭活对整个机体内环境的稳定的影响使举例阐述补体如何维持机体内环境的动态平衡补体（plement）是存在于人和动物正常新鲜血浆中具有酶样活性的一组不耐热的球蛋白。具有调理吞噬、杀伤细菌、溶解病毒、介导炎症、调节免疫应答和溶解清除免疫复合物等功能。 1 9世纪末，在研究免疫溶菌和免疫溶血反应中，认为这种球蛋白是对抗体的溶细胞有辅助作用的物质为这种球蛋白是对抗体的溶细胞有辅助作用的物质，因而得名补体。补体由9种成分组成，分别命名为 C1 、 C2、 C3、 …、C9。 C1 又有 3个亚单位即C1 q、成分大多是以酶的前体形式存在于血清。补体系统是30多种广泛存在于人和脊椎动物正常新鲜血清中的非特异性球蛋白，是由补体固有成份、补体受体、血浆及细胞膜补体调节蛋白等蛋白组成。因而得C1 r和C1 s。除C1 q外，其他补体的激活是指补体由无活性形式转变为活性形式的过程。指在某些激活物作用下补体激活的三条途径使补体各固有成分依次补体激活的三条途径使补体各固有成分依次被活化，形成具有活性的酶。补体激活的三条途径分别为经典途径，旁路途经， MBL途径。补体系统的激活• （1 ）经典途径• （2）旁路途经• （3） MBL途径C4b2aC4b2a3b 补体的灭活是使血液制品，特别是血清中的补体失去活性。不灭活补体的血液制品具有溶血作用，通过56度1 5到30分钟或61 度2min灭活后，补体失去活性，对细胞就没有破坏作用了。返回机体的绝大部分细胞，并不直接与外界环境接触，而是生活在细胞外液之中，通过与细胞外液不断进行物质交换而维持其生命活动。这种构成细胞生活环境的细胞外液称之为内环境，以区别于整个机体赖以生存的外环境. 人体通过消化呼吸血液循环排泄免疫等系统，呼吸，血液循环，排泄，免疫等系统，在自身神经和激素的调节下稳态是指机体通过调节作用，使各个系统、器官协调活动，共同维持内环境的相对稳定。在自身神经和激素返回补体的激活对整个机体内环境的影响补体激活过程中会产生多种裂解片段，并通过与细胞膜相应受体结合而介导出多种生物功能如溶解和杀伤作用，免疫粘附作用，调理作用，炎性介质作用。1 .溶解和杀伤作用：指细菌进入机体后，细菌的细胞壁脂多糖可通过替代激活途径激活C3（属非特异性免疫），细菌与特异性抗体结合后可通过经典激活途径激活补体（属特异与特异性抗体结合后可通过经典激活途径激活补体（属特异性免疫）。2.免疫粘附作用指与C3b结合的颗粒或抗原-抗体复合物，有粘附红细胞和血小板的能力，再将免疫复合物转移至肝脾内被巨噬细胞清除。这是机体清除循环免疫复合物的重要机制。 3.调理作用：指C3b,C4b和iC3b与细菌或其他颗粒结合，通过与吞噬细胞表面CR1 ， CR3， CR4结合而促进吞噬作用。这种调理吞噬作用可能是机体抵抗全身性细菌和真菌感染的主要机制之一。4.炎性介质作用：分为趋化作用和过敏毒素作用。趋化作用指补体在激活过程中释放的C3a、 C5a、 C567等对中性粒细胞和巨噬细胞有趋化作用，可吸引它们向病原体存在的部位移行和集中，进行吞噬作用，同时也造成炎症反应。过敏毒素作用指C3a、 C5a能 *** 肥大细胞和血小板释放组织胺等药理活性物质，从而引起平滑肌收缩、血管通透性增高等超敏反应。这些由补体激活产生的生物功能都起到了维护机体内环境稳定的作用。补体的灭活对整个机体内环境的影响补体系统若过度激活，不仅会消耗大量补体成分，使机体抗感染能力下降。而且在激活过程中产生的大量衍生物活性物质生的大量衍生物活性物质，会使机体发生剧烈的炎症反应或造成组织损伤，引起病理过程。这种过度激活及其所造成的不良后果，可通过补体灭活而避免。血清中含有多种补体成分的抑制物或灭活因子，可分别灭活特定的补体成分以保持机体内环境的稳定。会使机体发生剧烈的炎返回补体在维持机体内环境稳定中起到清除免疫复合物抑制新的免疫复合物形成以及清除凋亡细胞的作用。清除免疫复合物：机体血循环中持续形成少量IC。抗原略多于抗体时IC沉积在血管壁，通过激活补体产生C3b，红细胞表面的CR1 与带有C3b的免疫复合物结合运送至肝脏被C3b的免疫复合物结合，运送至肝脏被清除。清除凋亡细胞：在生理条件下，机体经常产生大量凋亡细胞，细胞表面表达多种自身抗原，不及时清除，可引起自身免疫病。补体成分均可识别和结合凋亡细胞，并通过与吞噬细胞表面受体相互作用而参与对这些细胞的清除。精品课件，你值得拥有！精品课件，你值得拥有！精品课件，你值得拥有！使用时，直接删除本页！精品课件，你值得拥有！精品课件，你值得拥有！精品课件，你值得拥有！使用时，直接删除本页！精品课件，你值得拥有！精品课件，你值得拥有！精品课件，你值得拥有！使用时，直接删除本页！

F. 为什么要热灭活血清

加热来可以灭活补体系统。激活的补源体参与溶解细胞事件， *** 平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。去生物帮了解下， //bio1000/reseach/biomolecular/ 分子生物学研究进展,分子生物学实验,现代分子生物学。

G. 为什么要对溶血素中的补体进行灭活

可能是怕那些病菌呀，什么细菌之类的带传染的吧，传染给另外一个人