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如果通过双向电泳筛选得到一个差异表达蛋白质,如何继续研究该蛋白质的结构与

发布网友 发布时间:2022-05-04 11:00

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热心网友 时间:2023-10-22 07:21

电泳仪的原理:带电粒子在直流电场作用下于一定介质中所发生的定向运动,利用这一现象对化学或生物化学组分进行分离分析的技术称之为电泳。

双向电泳就是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合。
1.先进行等电聚焦电泳(按照蛋白等电点pI分离):在胶中加入双性电解质溶液,加上电场后建立稳定PH梯度,蛋白质溶液加入后建立电场,蛋白以不同PI分离开来。
2.然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小):将上一步的胶加上横向电场,同一PI中聚集的蛋白,由于分子量不同而分开。
经染色(一般是银染)得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。

二维电泳使用于蛋白组学研究,对大批量蛋白筛选鉴定中存在很大优势,通过不同胶做对比,把不同处的胶割出来单独鉴定。

热心网友 时间:2023-10-22 07:21

电泳仪的原理:带电粒子在直流电场作用下于一定介质中所发生的定向运动,利用这一现象对化学或生物化学组分进行分离分析的技术称之为电泳。

双向电泳就是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合。
1.先进行等电聚焦电泳(按照蛋白等电点pI分离):在胶中加入双性电解质溶液,加上电场后建立稳定PH梯度,蛋白质溶液加入后建立电场,蛋白以不同PI分离开来。
2.然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小):将上一步的胶加上横向电场,同一PI中聚集的蛋白,由于分子量不同而分开。
经染色(一般是银染)得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。

二维电泳使用于蛋白组学研究,对大批量蛋白筛选鉴定中存在很大优势,通过不同胶做对比,把不同处的胶割出来单独鉴定。

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