柱色谱在洗脱和分离过程中应注意些什么?
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发布时间:2023-12-25 16:15
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时间:2024-08-05 07:07
1、对吸附剂要求是什么?
2、为什么极性的组分要用极性大的溶剂洗脱?
3、柱色谱在洗脱和分离过程中,应注意些什么?
4、柱子中若留有空气或填装不均匀,会怎样影响分离效果?如何避免?
1、答:(1)它不溶于所使用的溶剂,与要分离的物质不起化学反应,也不起催化作用等。
(2)吸附剂表面积大,颗粒大小均匀,最好是无色的,以便于显色及辨认。
(3)具有一定的机械强度和颗粒度。
2、答:因为根据物质结构相似相溶原理,极性大的物质溶于极性大的溶剂,极性大的溶剂易取代被吸附的物质。因此极性大的组分要用极性大的溶剂才能洗脱下来。若用极性小的溶剂则难以洗脱。
3、答:(1)要持续不断地加入洗脱剂,并保持一定的液面高度。在整个操作中应注意不使吸附剂表面的溶液漏干。一旦柱面溶液流干后再加溶剂,易使柱中发生气泡和裂缝,影响分离。
4、答:柱子中若留有空气或填装不均匀,会影响渗滤速度和产生参差不齐的色谱带,分离效果很差。
为了避免柱子中产生空气或填装不均匀,应采取以下措施:
(1)在装柱之前,应将棉花用溶剂润湿,否则柱子会有空气泡。
(2)向柱子中倒入溶剂约为柱高3/4处,打开活塞,控制流出速度(1滴/秒)。然后慢慢加入吸附剂,用木棒或带橡皮管的玻棒轻轻敲打柱身下部,使填装紧密。