定量PCR实验后,一般要得到什么样的结果?
发布网友
发布时间:2022-04-20 22:18
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热心网友
时间:2023-04-24 20:32
定量PCR
【定义】
定量PCR是PCR的一种。PCR仪目的为了基因扩增。在基因扩增中最重要的就是升降温过程,最早的PCR就是三个水浴锅,一个机械臂,定时抓出反应槽转换水浴锅。PCR的结果需要借助其他手段来检测。后来随着定量技术的发展,将PCR和检测做成一体,就形成了定量PCR仪。还可以与荧光技术结合,同时在每个扩增过程都能实施监控。
【应用】 :定量PCR可以得出准确的定量结果,改变了PCR只用作微量物定性测定的历史,并可进行动态检测和病程疗效分析。同时让质控的建立成为可能,以保证结果的准确性。能对基因突变进行分析。
热心网友
时间:2023-04-24 20:32
定量PCR可以用来比较模板的数量多少。
比如可以用来对比不同基因的表达情况,或者相同基因在不同时期的表达情况。
热心网友
时间:2023-04-24 20:33
确定模板的丰度
热心网友
时间:2023-04-24 20:33
定量PCR有绝对定量跟相对定量,绝对定量就是先用已知浓度的质粒浓度梯度(1.00E+07、1.00E+06、1.00E+05、1.00E+04、1.00E+03)制作标准曲线,然后通过做Real-time PCR的CT值计算出其表达量;相对定量是比较管家基因(GAPDH)与目的基因的CT值,得出各标本之间目的基因表达量的多少。
目前实时荧光定量PCR主要用两种方法:染料法和探针法,如果科研资金充足的话,建议选用探针法,其数据比染料法准确。染料法也可以达到定量的目的,而且比较廉价。