发布网友 发布时间:2024-01-12 04:25
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热心网友 时间:2024-01-14 08:10
图1. 过表达载体构建示意图目前已从动物、植物、病毒及微生物中分离到许多适用于植物的启动子。根据作用方式及功能可将启动子分为3 类:组成型启动子(constitutive promoter)、诱导型启动子(incible promoter)和组织特异型启动子(tissue-specific promoter),这种分类基本可反映各自特点,但在某些情况下,一种类型的启动子往往兼具其它类型启动子的特征。目的基因过量表达载体构建完成后,有多种使用途径,其中最常用的有以下两种:一,通过农杆菌介导或基因*法等转化稳定表达系统,如拟南芥、水稻、烟草、番茄等,获得转基因阳性苗;二,通过PEG-Ca2+介导转化法或电击法转化原生质体,如水稻、拟南芥,或通过农杆菌侵染或注射法转化烟草叶片,进行亚细胞定位或蛋白互作验证等实验。(一)过表达转基因植株的创制将目的基因导入植物细胞(特指稳定表达系统)通常可通过农杆菌介导法、花粉管通道法、基因*法、显微注射法等进行,其中,农杆菌介导法是较常用的遗传转化方法,另外,单子叶植物也可用基因*法,绿色开花植物可采用花粉管通道法,因为容易操作且经济实惠。