硫酸苯酚法测定总糖原理与步骤

发布网友发布时间：2024-02-01 10:57

共1个回答

热心网友时间：2024-02-04 02:13

1、原理：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。
2、步骤：取适量苯酚（A.R），高温蒸馏，收集180℃馏分，称取50.0g，用水溶解，最后定容于1000ml棕色容量瓶中，冷藏避光保存，精称110℃恒重的葡萄糖20.0mg，用水溶解，定容至100ml。精密吸取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml分别置于100ml量瓶中加水定容至刻度，摇匀得葡萄糖稀释液，分别精密量取上述各稀释液2ml置具塞试管中，同时精密量取水2.0ml置另一具塞试管中，各管分别加5%苯酚溶液（新制）1ml，摇匀，然后迅速加入浓硫酸5.0ml，立即摇匀，吸取已定容的水解样（必要时可稀释到一定体积）2.0ml置于25ml比色管中，加5%苯酚试剂1.0ml，迅速滴加5.0ml浓硫酸，摇匀后在室温下静置30min；每个样品做三个平行样。