...DE)和质谱(MS)技术在蛋白质组学研究中的应用。

发布网友发布时间：2024-03-11 13:43

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热心网友时间：2024-08-08 16:40

【答案】：蛋白质组学（Proteomics）：指在大规模水平上研究蛋白质的特征，包括蛋白质表达水平，翻译后修饰，蛋白与蛋白相互作用等，由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生，细胞代谢等过程的整体而全面的认识。
目前蛋白质组学研究在表达蛋白质组学方面研究的最为广泛，其分析通常有三个步骤：第一步、运用2-DE技术分离样品中的蛋白质；第二步、应用质谱技术或N末端测序鉴定2-DE分离的蛋白质；第三步、应用生物信息学技术存储、处理、比较获得的数据。
（1）2-DE（Two-dimensional gel electrophoresis，双相凝胶电泳）
2-DE在1975年出现，是一项广泛应用于分离细胞、组织、或其他生物样品中蛋白质混合物的技术。它根据蛋白质不同的特点分两相分离蛋白质。第一相是等电聚焦（IEF.电泳，根据蛋白质等电点的不同进行分离。
第二相是SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE.，根据蛋白质的分子量不同进行分离。经过2-DE以后，二维平面上每一个点一般代表了一种蛋白，这样成千种不同的蛋白即可被分离，有关蛋白质的等电点、分子量及每种蛋白的数量信息也可以得到。
（2）MS（MassSpectrometry，质谱）
对2-DE所产生的上千个蛋白用传统的方法如Edman降解法等进行分析将是一个很艰巨的任务。质谱技术的发展解决了这一难题。它需要三个步骤，首先通过离子化装置将分子转化为气态离子，接着通过质谱分析器按照质荷比（m/z）的不同进行分离，最后转化到离子检测装置。