蛋白芯片样品处理方法及用量建议
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发布时间:2024-06-03 11:41
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时间:2024-06-05 22:24
天津舍为斯生物携手RayBiotech,为您揭示蛋白芯片样本处理的奥秘
适用样本广泛
涵盖各类液体样本:血清、血浆的处理需离心取上清,冷冻保存。例如,离心后血清/血浆的上清液成为首选。尿液同样离心冷冻,而尿液样本的独特性使其成为研究的新领域。
细胞样本与组织样本
细胞上清:优先无血清培养,收集后同样离心并冷冻。
细胞裂解液:先清洗、裂解,再离心取上清,冷冻处理以保持活性。
细胞本身:仅需清洗后进行冷冻保存。
组织样本:研磨后离心取上清,同样冷冻以防活性流失。
样品处理步骤详解
细胞裂解液的准备:添加蛋白酶抑制剂,1X Cell Lysis Buffer溶解后充分混匀,随后配制20ul酶抑制剂与1980ul缓冲液,形成含抑制剂裂解液,备用。
组织裂解步骤:使用预冷的缓冲液处理,通过剪碎、匀浆、离心并取上清,最终冷冻保存。
细胞裂解步骤:首先稀释2X Cell Lysis Buffer,加入Protease Inhibitor Cocktail,经过细胞洗涤、刮取、离心,上清液冷冻以保持蛋白活性。
样品浓度要求
为了确保实验数据的准确性和可靠性,蛋白浓度需达到至少5mg/ml。如有需要,可使用商业酶抑制剂或2M PMSF,但务必避免反复冻融,同时,干冰运输是样本安全的关键。
用量建议与表格支持
对于不同类型的样本,具体用量请参阅我们提供的详细表格,这将帮助您准确控制样本用量,提高实验效率。