...制备技术的基础是___.(2)细胞融合是随机的过程,
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发布时间:2024-05-12 00:06
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时间:2024-06-03 21:35
(1)单克隆抗体制备技术是动物细胞融合技术的应用之一,其基础是动物细胞培养.
(2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞).在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐,但要注意无机盐的种类和浓度,关注培养基的渗透压和营养充沛,以保证生命活动的正常进行.
(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/ml,每孔滴入0.1ml细胞稀释液,其目的是使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的(或单一细胞培养以保证抗体的纯度).
(4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,单克隆抗体是分泌蛋白质,首先在核糖体中合成,在内质网上初步加工,之后内质网边缘以“出芽”形式冒出囊泡,囊泡离开内质网,转移到高尔基体上,与高尔基体膜融合,囊泡中的物质也进入到高尔基体中,在高尔基体中进一步加工成成熟的蛋白质,高尔基体膜也突起形成小泡,小泡离开高尔基体,转移到细胞膜上,小泡中物质释放到细胞膜外.因此放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜.
故答案为:
(1)动物细胞培养
(2)筛选杂交瘤细胞 种类和数量(浓度)
(3)使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的(或单一细胞培养以保证抗体的纯度)
(4)核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜