高分~~急求 如果要用PCR扩增下列IL-8序列,请写出上游引物和下游引物的序...
发布网友
发布时间:2024-07-03 03:51
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热心网友
时间:2024-08-20 09:55
我估计你是要扩出整个CDS的,所以引物设计只能从两端起始,
上游:5' ATGGCTGCTGAACCAGTAGA 3'
下游:5' CTAGTCTTCGTTTTGAACAG 3'
只要模版正确,通过PCR条件优化肯定能扩出以上片段的
你可以按照我给的去合成了, 帮你软件分析了,GC含量 退火温度都是可以的
热心网友
时间:2024-08-20 09:56
你想要多长的PCR产物?
上游:5'GCTGAACCAGTAGAAGACAA 3'
下游:5'AGTCTTCGTTTTGAACAGTG 3'
产物574bp,退火温度49.9度。
评分94分,没有发卡结构,不能形成引物二聚体。
可以么?
如果你这个是一个编码序列(因为我看到前三个碱基是ATG,编码甲硫氨酸)用楼下那个:
5' ATGGCTGCTGAACCAGTAGA 3'
5' CTAGTCTTCGTTTTGAACAG 3'
也是可以的。只是两个引物的退火温度要相差将近6度。