请你利用所学的分子生物学知识设计一个实验方案
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发布时间：2022-04-21 09:03
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热心网友
时间：2023-11-08 14:37
查找人胰岛素的基因序列，人工合成之后连接到酵母菌的质粒载体上，质粒上应有标记基因，培养并筛选连接成功的酵母菌，再进行培养，检测其产物是否为胰岛素，选择产物是胰岛素的酵母菌进行培养，收集所产胰岛素，分离纯化，实验验证，临床应用。
首先克隆人的胰岛素基因——与酵母载体连接构建酵母表达载体——将重组体转入酵母细胞中——在30度条件下培养即可得到大量含胰岛素的酵母细胞——破碎酵母细胞，提取胰岛素——纯化胰岛素蛋白即可得到大量胰岛素。
扩展资料：
①生物化学和生物物理学是用化学的和物理学的方法研究在分子水平，细胞水平，整体水平乃至群体水平等不同层次上的生物学问题。而分子生物学则着重在分子（包括多分子体系）水平上研究生命活动的普遍规律；
②在分子水平上，分子生物学着重研究的是大分子，主要是蛋白质，核酸，脂质体系以及部分多糖及其复合体系。而一些小分子物质在生物体内的转化则属生物化学的范围；
参考资料来源：百度百科-分子生物学
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时间：2023-11-08 14:37
1.冰箱:根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。
2.培养箱：37℃恒温箱用于细菌的平板培养及分子生物学实验。
3.恒温培养摇床：用于大肠杆菌等生物工程菌种的扩增。
4.水浴锅：用于保温并进行各类实验。25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。含低温的水浴槽可以用于分子生物学的质粒与基因片段的连接等实验及用于42度的大肠杆菌感受态的热激。
5.烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。
6.超纯水机：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高，用自来水、蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。
7.蒸汽消毒锅：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒。
8.滤器滤膜：不耐高温、高压的试剂用其处菌。
9.各种天平：台秤、精密电子分析天平，用于精确称量各类试剂。
10.液体体积的度量：量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯、锥形瓶等。
11.pH计：测定溶液中H+的直接电位的仪器，主要通过一对电极，在不同的pH溶液中产生不同的电动势用pH值表示出来；
pH试纸：只适用于培养液、酚饱和液、缓冲液或其它试剂溶液的pH值的粗略估计。而大部分试剂的配制要求严格的pH值，需精确度高（小数点后两位）的pH计。
12.分光光度计：光密度、分光光度计是利用物质在可见光和紫外线区域中的吸收光谱来鉴定该物质的性质及其含量的一种仪器。它是由光源、单色器、吸收池、接收器、测量仪表或显示屏幕所组成。OD值是许多溶液中溶质定量的方便指标之一，通过所产生的单色光而测定某一溶液对该单色光的吸收值，利用它可进行核酸溶液定量和纯度的初步判断。OD值也可以作为菌浓的检测指标。
13.高速离心机：最大转速25000r/m，最大离心力89000g。有冷冻和常温两种，多用于制备和手收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸铵沉淀物以及免疫沉淀物等。
14.超净工作台：内有紫外灯、照明灯、还应有酒精灯火焰、75%乙醇等灭菌的设备，是一种提供局部洁净度的设备。其原理是鼓风机驱动空气，经过低、中效的过滤器后，通过工作台面，使实验操作区域成为无菌的环境。
15.电泳系统：电泳技术是检测、鉴定各种生物大分子的纯度、含量及描述它们的特征，甚至还是分离、纯化、回收和浓缩样品的工具之一。电泳系统分为电源和电泳槽，电源需经稳流通过稳压器，既能提供稳定的直流电，又能输出稳定的电压；水平式电泳槽：一般分为微型电泳槽和大号水平式电泳槽
16.PCR仪：PolymeraseChainReaction仪，也称DNA热循环仪，基因扩增仪，它是使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数百万倍的靶序列DN*段，它的每一循环包括在三种不同温度进行的DNA变性，引物复性，DNA聚合酶催化的延伸反应三个过程。需要说明的是，有些实验室可能还需要梯度PCR仪或实事定量荧光PCR仪来进行一些特殊的分子生物学实验。
17.凝胶成像分析系统：对电泳后含溴乙锭（EB）核酸样品的观察分析。
18.其他设备
（1）微波炉：便于一些溶液的快速加热和定温加热，电泳琼脂糖凝胶配制、溶化等。
（ 2）*机：用于制造大多数核酸、蛋白质的实验操作所需的低温环境，以减少核酸酶或蛋白质酶的水解。
（3）层析装置：（色谱分离）是一种分离多组分混合物的有效物理方法。
真空印记系统，DNA合成/测序仪：这些都是对核酸进行深入研究的必备仪器。
（4）磁力搅拌器：多角度旋转混匀器、快速振荡混合器：用于混合仪器。
（5）组织匀浆器：超声组织及细胞破碎器，用其进行样品的分离提纯实验。
（6）通风橱：很多溶剂能逸出毒气，必备柜，放射性试验还要有有机玻璃屏蔽。
（7）玻璃蒸馏器、电热加帽、变压器：用于酚等有机溶剂的蒸馏。
（8 ）Tip头、Eppendorf管：微管移液器tip头（吸液尖）、Eppendorf管（微量离心管）可洗涤，硅化消毒后反复使用。对一些要求严格的实验，如RNA的提取、保存等操作，应使用新的消毒tip头与Eppendorf管。另外还应备有常用规格的离心管（1000ml、500ml、250ml、50ml、7ml等）及96孔、24孔、12孔、6孔的细胞培养塑料平板等。
（9）小型设备、用具：定时器、滤膜、保鲜膜、防护眼镜鸭嘴镊、常规的玻璃或塑料器皿（包括平皿、试管、烧杯、量瓶、试剂分液漏斗、避光保存的试剂应使用棕色试剂瓶，如饱和酚、巯基乙醇等）、记号笔、各种手套PE、乳胶、家用、防酸的等）追问怎么没有连贯的流程呢
追答我先把各个著名学家的心得法给你，至于流程图你可以根据实验过程自己画出来的，没必要再找别人来完成啊！！！你说呢？？？
现在我把心得依次传给你。。。。。
（1） 关于分子生物学实验的体会
梁慧媛（生技01级）
不知不觉间，一年的时间就这样流逝了，与分子生物实验相伴，对我而言，的确不同寻常。并不仅仅是学习生物学实验技术和方法的宝贵经历，它意味着更多。
首先是实验条件、实验过程、实验设计的完备性，从这里可以初步感受到生物学研究的科学性与严肃性，自己可以得到宝贵的机会，亲身体会生物学研究的苦辣酸甜。 一直一直喜欢，得到正确实验结果时刻的畅快感，那是无法言明的欣慰感，一次身心彻底地放松，可以将所有一整天来积累的疲劳抛之身后，即使仅仅是小小的成功，也会让我们兴奋不已。在整理资料，将一年来保存的记录一遍一遍的翻看，重温其中的特别滋味，我，轻轻地笑了。我，喜欢这里，喜欢生物学。
失误是常有的，经历过吃惊、后悔、无奈，检讨分析，最后重新开始。一波三折的记忆清晰的印在脑海中，这种深深的挫折感，再试一次的勇气，我会一生记取的。
一年间，随着对生物学实验知识和技能的进一步学习，我更坚定了自己学习生物学的志向，感谢分子生物学实验的"试炼"。
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时间：2023-11-08 14:38
查找人胰岛素的基因序列，人工合成之后连接到酵母菌的质粒载体上，质粒上应有标记基因，培养并筛选连接成功的酵母菌，再进行培养，检测其产物是否为胰岛素，选择产物是胰岛素的酵母菌进行培养，收集所产胰岛素，分离纯化，实验验证，临床应用。
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时间：2023-11-08 14:38
初中，高中，大学，硕士，博士题？否则无法答，因为深度和广度不同。
热心网友
时间：2023-11-08 14:39
（2）样品前处理：液体或固体的处理方法不同
（3）梯度稀释，涂平板
（4）挑单菌落，继续纯化
（5）生理生化实验或者分子生物学方法进行菌种鉴定
还不明白给我发消息
追问我需要的是一个试验流程，具体的
