逆转录PCR和实时PCR
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发布时间:2022-04-30 17:12
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时间:2022-06-28 05:22
逆转录PCR,或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。
由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成。随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶 H降解,留下互补DNA。
RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术,可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断,并且可以用于定量监测某种RNA的含量。(检测基因表达的方法,参见Northern Blot法。)
RT-PCR有时候也会指代实时PCR(real-time PCR)。为了与逆转录PCR相区别,通常被写作“定量PCR”(quantitative PCR)或者RTQ-PCR(real-time quantitative PCR)。
实时PCR(real-time PCR),属于定量PCR(Q-PCR)的一种,以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。
real time PCR 的定量使用萤光色素,目前有二种方法。一种是在ds DNA中插入特异的萤光色素;另一种使用一种能与增幅DNA序列中特定寡核酸序列相结合的一种萤光探针(probe)。
real time PCR 与 reverse transcription PCR 相结合,能用微量的RNA来找出特定时间、细胞、组织内的特别表达的遗传基因。这两种RT PCR的组合又被称之为“定量RT-PCR(quantitative RT-PCR)”
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时间:2022-06-28 05:23
反转录RCR(reverse transcription PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。
由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成。随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶 H降解,留下互补DNA。
实时PCR(real-time PCR),属于定量PCR(Q-PCR)的一种,以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。
real time PCR 的定量使用萤光色素,目前有二种方法。一种是在ds DNA中插入特异的萤光色素;另一种使用一种能与增幅DNA序列中特定寡核酸序列相结合的一种萤光探针(probe)。
real time PCR 与 reverse transcription PCR 相结合,能用微量的RNA来找出特定时间、细胞、组织内的特别表达的遗传基因。这两种RT PCR的组合又被称之为“定量RT-PCR(quantitative RT-PCR)”
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时间:2022-06-28 05:23
一个是实验过程,一个是分析方法
PCR的原理
PCR技术通常有两种解读:一是逆转录PCR,二是实时PCR。首先,逆转录PCR是通过逆转录酶,一种能将RNA转化为DNA的酶,以mRNA为模板进行工作的。这个过程与中心法则的DNA-RNA-蛋白质顺序相反,因此被称为逆转录。它结合了引物和模板,与PCR的链式扩增反应原理相似,所以称为RT-PCR。这项技术的主要应用是...
秒懂RT-PCR、QPCR、Real-time PCR、real-time RT-PCR的区别
尽管Real-time PCR和RT-PCR的名字相似,国际上通常将RT-PCR特指逆转录PCR,而Real-time PCR则指定量实时PCR,简写为qPCR。Real-time RT-PCR,即RT-qPCR,是这两个过程的结合,首先通过逆转录将RNA转化为cDNA(即从mRNA或总RNA模板),然后使用实时荧光PCR进行定量分析。这种技术不仅能检测cDNA,还能应...
逆转录PCR和实时PCR
逆转录PCR,或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成。随后,DNA...
rt pcr的原理及步骤
原理:RT-PCR 为反转录RCR(reverse transcription PCR)和实时PCR(real timePCR)共同的缩写.逆转录PCR,或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形.在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增.步骤:(一)预变性...
如何选择绝对定量RT-PCR的数据统计分析方法
根据正态、方差齐、样本量等选择分析方法 我替别人做这类的数据分析蛮多的
逆转录PCR实时PCR
当实时PCR与逆转录PCR(reverse transcription PCR)结合,它能够在极少量的RNA样本中,精确地检测特定时间、细胞或组织中特定基因的表达情况。这种结合应用通常被称为定量逆转录实时PCR(quantitative RT-PCR),它极大地扩展了基因表达研究的精确度和灵敏度,对于生物学研究和疾病诊断具有重要意义。
RT-PCR,QRT-PCR,real-timePCR之间什么区别
PCR:一种快速的DNA复制方法,由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成。RT-PCR:反转录PCR(reverse transcription-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA(cDNA),再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。QRT-PCR在RT-PCR体系中同时加入内参...
简述至少3种由PCR技术衍生出来的技术及其应用?
【答案】:①逆转录PCR技术,将RNA的逆转录反应和PCR反应联合应用的一种技术,是目前从组织或细胞中获得目的基因以及对已知序列的RNA进行定性及半定量分析的最有效方法;②原位PCR技术,将PCR技术与原位杂交技术相结合,在甲醛固定、石蜡包埋的组织切片或细胞涂片上的单个细胞内进行的PCR反应,然后用特异性...
请写出3-4种pcr技术及其应用。
基因表达分析: RT-PCR可以用来研究特定基因的表达情况。通过逆转录,将mRNA转录为cDNA,然后进行PCR扩增,以检测该基因是否在特定条件下被表达。病毒学研究: RT-PCR被广泛用于检测病毒RNA,例如HIV、流感病毒等,因为这些病毒的遗传物质是RNA。3. 实时定量PCR(qPCR)技术:实时定量PCR是一种可以实时监测...
逆转录pcr和实时荧光pcr的区别
逆转录PCR是指用逆转录酶将RNA转录成DNA的过程。荧光PCR是指借助PCR扩增和荧光染料检测模板中目的基因含量的实验技术。