请问免疫组化如何正确选择和使用二抗

发布网友发布时间：2022-04-30 07:52

共3个回答

热心网友时间：2022-06-19 08:01

1 种属来源要匹配：根据所用一抗选定二抗。一般来说，如果一抗是小鼠源性，二抗应选择兔/山羊或其它种属抗小鼠的抗体。目前，美国Vector公司和 Zymed公司都有开发的用小鼠抗体检测小鼠组织的试剂盒，即一抗来源于小鼠，该试剂盒采用了通用非特异性封闭液和专利封闭内源性小鼠Ig的封闭液，可以得到清晰的染色背景。
2.注意抗体同种型和亚型：确定一抗同种型和亚型后，可以选择抗一抗来源种属广谱Ig或针对一抗亚型的二抗。如一抗是小鼠IgG1，可以选用山羊抗小鼠的Ig或IgG1的二抗。
3.正确使用：也需要重新选择稀释比例。一般供应商提供稀释比例从1：10稀释度始，作5倍比稀释。
参考网址on http://www.bio1000.com/zt/experiment/284333.html

热心网友时间：2022-06-19 08:02

二抗是根据一抗来选的。这种情况是需要先选择一抗（一抗的要求是能做组化，而且要是抗人的，因样本是人来源的，如果是石蜡片，那一抗的应用最起码要包含IHP，冰冻片就是IHF），一抗的种类以兔多抗和小鼠单抗为主，要根据肿浆的需要选择。因为一抗与二抗是抗原抗体的结合，所以如果一抗是兔多抗，二抗就要选XX抗兔IgG（以羊抗兔居多），同理一抗为小鼠单抗，二抗就是XX抗小鼠IgG。另外封闭液最好选与二抗同种属的血清，比如羊血清。

热心网友时间：2022-06-19 08:02

3.正确使用：也需要重新选择稀释比例。一般供应商提供稀释比例从1：10稀释度始，作5倍比稀释。