有A、B、C、D四种小分子化合物，请用肿瘤A549细胞筛选能够有效诱导细胞凋亡的小分子化合物。

发布网友发布时间：2022-05-02 02:05

共3个回答

热心网友时间：2023-10-09 02:26

1、培养A549细胞，了解A549细胞的倍增周期，扩增A549细胞；
2、收集A549细胞并计数，按照一定的密度如2500细胞/孔，25uL/孔(参考值，需进行优化)进行铺板；
3、在细胞板内培养一定时间，如24h等，该时间需要根据具体实验和铺板密度来确定，并且需要优化，至少要等到细胞贴壁之后才可以进行下一步；
4、配制ABCD化合物溶液，通常将化合物溶解在DMSO中。由于细胞对DMSO敏感，因此在进行正式实验之前需要对实验体系进行DMSO耐受测试，获得A549在该实验体系中的最大DMSO耐受量。假设A549能够耐受1%的DMSO，那么需要配制100×终浓度的ABCD化合物溶液，并用培养基稀释到终浓度。
5、弃掉细胞培养板中的培养液，将配好的化合物溶液转移到细胞培养板中，进行加药处理；
6、培养一段时间，例如24h，48h等(该时间需要进行优化)，取出细胞培养板，向其中加入Promega Caspase 3/7 Glo检测试剂，震荡10分钟后用酶标仪读板。
7、将获得的数值与阴性对照、阳性对照进行比较并转换成作用百分比，即可判断该化合物是否有效。如果化合物配制时是配制的梯度溶液，还能获得活性化合物的IC50.

热心网友时间：2023-10-09 02:27

设置对照然后在培养的时候分别加进去这些东西，看看那个细胞死的快。

热心网友时间：2023-10-09 02:27

那一年
我们也做过，你这样问题太笼统
你可以参考你们班成绩比较好的
会有所帮助
最后感觉不错的话
请采纳