发布网友 发布时间:2023-09-18 15:33
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热心网友 时间:2024-12-02 14:19
血小板在血栓形成和止血过程中起著关键作用。临床研究表明,许多疾病的发生都与血小板活化有关,血小板在活化过程中,不仅形态和生化代谢发生改变,其膜蛋白的结构和组分也发生变化。血小板α颗粒膜蛋白(αgranule membrane protein140,GMP140)是血小板活化释放的特异标志之一,可反映体内血小板的活化程度及血栓形成倾向,为人类血栓性疾病的早期诊断、治疗提供了一条新的途径,对其它疾病的诊断也具有重要的价值。
颗粒膜蛋白140;GMP140
颗粒膜蛋白140
血液生化检查 > 蛋白质测定
血液
血小板在诱导剂 *** 下,α颗粒膜蛋白GMP140整合到活化血小板浆膜上,成为血小板活化的标记。利用放射性核素标记的抗GMP140单克隆抗体直接测定血小板表面GMP140的含量,以反映体内外血小板的活化程度。
(1)抗凝剂:0.73mol/L EDTANa2溶液。
(2)固定剂:20mmol/L戊二醛3mmol/L叠氮钠PBS,pH7.4。
(3)洗涤液或抗体稀释液:50μmol/LBSAPBS(pH7.4)。
(4)125Ⅰ标记的单克隆抗体(SZ51,苏州医学院)。
用塑料注射器抽取静脉血,以9∶1(V/V)的0.73mol/L EDTANa2抗凝,取0.5ml抗凝血与等量的固定剂混合。室温放置30min,即为固定的全血。以洗涤液调血小板数为2.5×106/L,取100μl固定全血(2.5×106血小板),用洗涤液洗涤1次,加入50μl(0.1μg/管)125ⅠSZ51抗体,充分混匀,室温30min。而非特异吸附以100倍未标记的SZ51抗体同时加入反应管,以洗涤液洗3次。每个测定管均为复管,将特异结合在血小板上的cpm换算成每个血小板上GMP140的分子数(假定1个抗体分子与1个GMP140分子结合)。
单克隆抗体SZ51测定法:平均分子数:720.63~1148.57。
(1)显著升高:流行性出血热休克期、少尿期。
(2)一般升高:流行性出血热多尿期。
血小板计数要精确,它直接影响测定结果。本法批内CV 6.2%,批间CV 8.8%。