基因重组实验怎么做?
发布网友
发布时间：2022-04-25 21:11
共2个回答
热心网友
时间：2022-06-17 13:33
首先去NCBI上查这个基因的mRNA上CDS序列 设计引物要求扩增产物包含整个CDS区 引物上带双酶切位点 内切酶的选择根据质粒载体的多克隆位点
然后找一个表达该基因的细胞系提RNA 反转录成cDNA 作为模板用引物进行PCR扩增
将PCR产物和质粒载体分别做双酶切
酶切产物用连接酶进行连接
转化 涂板 菌P 摇菌 提质粒
运气好的话一周可以搞定
仪器： PCR仪 水浴锅或者金属浴 恒温摇床 电泳仪
试剂：Trizol 异丙醇 氯仿 酒精
PCR MIX *性内切酶 DNA连接酶
胶回收试剂盒 质粒小提试剂盒
热心网友
时间：2022-06-17 13:34
这个问题在这里问相当不靠谱啊
