效率很低或阳性克隆非常少,请问有哪些原因
发布网友
发布时间：2023-08-17 15:12
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热心网友
时间：2024-12-02 03:49
可能感受态细胞转化效率太低，用质粒作为阳性对照检测感受态的转化效率；
可以尝试提高载体或插入片段的纯度，对于平端连接需注意适当延长连接时间；
可能载体酶切不够充分，用未经连接的载体转化作为阴性对照；
连接体系不合适，如连接酶可能失活或活性下降，更换新的连接酶及Buffer；
连接条件不合适，温度或反应时间不合理，请仔细参照连接酶的产品说明书。
