培养基的常见培养基
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发布时间：2022-04-24 05:50
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时间：2023-10-03 05:34
牛肉膏琼脂培养基
牛肉膏0.3g ，蛋白胨1.0g，氯化钠0.5g，琼脂1.5g，水100ml
在烧杯内加水100ml，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2-7.6，分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌：1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15-30分钟。
牛心培养基
取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。
根瘤菌培养基
葡萄糖10g，磷酸氢二钾0.5g，碳酸钙3g，硫酸镁0.2g，酵母粉0.4琼脂20g，水1000ml，1%结晶紫溶液1ml。
先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。 淀粉*盐培养基（高氏一号培养基）
可溶性淀粉2.0g，*钾0.1g，磷酸氢二钾0.05g，氯化钠0.05g，硫酸镁0.05g，硫酸亚铁0.001g，琼脂2g，水100ml。
先把淀粉放在烧杯里，用5ml水调成糊状后，倒入95ml水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。在烧杯外做好记号，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水。调整pH值到7.2-7.4，分装后灭菌，备用。
面粉琼脂培养基
面粉60g，琼脂20g，水1000ml
把面粉用水调成糊状，加水到500ml，放在文火上煮30分钟。另取500ml水，放入琼脂，加热煮沸到溶解后，把两液调匀，补充水分，调整pH值到7.4，分装，灭菌，备用。 BG-11培养基
NaNO3 1.5g，K2HPO4 ·3H2O0.04g，MgSO4·7H2O0.075g，CaCl2 ·2H2O0.036g Citric Acid （柠檬酸 ）0.006g，Ferric ammonium citrate（柠檬酸铁铵0.006g，EDTA (dinatrium-salt) 0.001g，Na2CO3 0.02g，A5 + Co solution * （A5溶液1000×）1ml Distilled Water （蒸馏水）919ml
SE培养基 NaNO3 0.25g K2HPO4 . 3H2O 0.075g MgSO4 . 7H2O 0.075g CaCl2 . 2H2O 0.025g KH2PO4 0.175g NaCl 0.025 Soil extract 40ml FeCl3·6H2O 0.005 Fe—EDTA 1ml A5 solution 1000× 1ml distilled water 958ml Soil Extract(土壤提取液)配置方法
取花园土未施过肥0.5kg置于烧杯或三角瓶中，加入蒸馏水1000毫升，瓶口用透气塞封口，在水浴中沸水加热2小时，冷却数小时，在无菌条件下过滤，取上清液，将灭菌蒸馏水加入上清液至总体积1000毫升。土壤提取液保存在4ºC备用。
Composition of the A5 solution
Add to 100 ml of distilled water:（加入100ml 的蒸馏水） H3BO3 286 mg MnCl2 . 4H2O 181 mg ZnSO4 . 7H2O 22 mg CuSO4 . 5 H2O 7.9 mg (NH4）6Mo7O24 .4H2O 3.9 mg EDTA-Fe的配置方法：
将EDTA和FeCl3·6H2O分别溶于水和HCl(0.1N)，混匀即可。 Na2EDTA 1g distilled water 50ml FeCl3·6H2O 81 mg HCl（0.1N） 50ml Pr培养基
Preparation: to 997 mL of glass-distilled water, add 1.0 g proteose peptone, 15.0 g agar, and the following stock solutions: working solution g/1000 mL H2O NaNO3 0.25 CaCl2. 2H2O 0.025 MgSO4. 7H2O 0.075 K2HPO4 0.075 KH2PO4 0.175 NaCl 0.025 A5 solution 1ml EDTA-Fe 1ml FeCl3 (0.05%) 1ml A5溶液和EDTA-Fe溶液配制方法同上。 萨市（Sabouraud’s）培养基
蛋白胨10g，琼脂20g，麦芽糖40g，水1000ml
先把蛋白胨、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40g麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭菌，备用。
本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
马铃薯糖琼脂培养基
把马铃薯洗净去皮，取200g切成小块，加水1000ml，煮沸半小时后，补足水分。在滤液中加入10g琼脂，煮沸溶解后加糖20g（用于培养霉菌的加入蔗糖，用于培养酵母菌的加入葡萄糖），补足水分，分装，灭菌，备用。
把这培养基的pH值调到7.2-7.4，配方中的糖，如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。
豆芽汁培养基
黄豆芽100g，琼脂15g，葡萄糖20g，水1000ml
洗净黄豆芽，加水煮沸30分钟。用纱布过滤，滤液中加入琼脂，加热溶解后放入糖，搅拌使它溶解，补足水分到1000ml，分装，灭菌，备用。
把这培养基的pH值调到7.2-7.4，可用来培养细菌和放线菌。
豌豆琼脂培养基
豌豆80粒，琼脂5g，水200ml
取80粒干豌豆加水，煮沸1小时，用纱布过滤后，在滤液中加入琼脂，煮沸到溶解，分装，灭菌，备用。 马铃薯-蔗糖-琼脂培养基
20%马铃薯煮汁1000ml，蔗糖20g，琼脂18g
把马铃薯洗净去皮后，切成小块。称取马铃薯小块200g，加水1000ml，煮沸20分钟后，过滤。在滤汁中补足水分到1000ml，即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，补足水分，分装，灭菌，备用。使用该培养基对pH值要求不严格，可以不测定。
综合马铃薯培养基
20%马铃薯煮汁1000ml，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，葡萄糖20g，维生素10mg，琼脂18g
先配制20%马铃薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各种组分，加热溶解后补足水分，调整pH值到6。分装，灭菌，备用。 该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。 在植物组织培养时，通过调节IAA和CTK的比值能影响愈伤组织分化出根或芽。CTK/IAA高时，愈伤组织分化芽。
CTK/IAA低时，分化根；CTK/IAA比例适中维持愈伤组织不分化。
愈伤组织诱导培养基制备
以MS培养基母液为基础，向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ，维生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培养基后，再加入0.5mg·L-1的BA8mL，0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水，加入40g蔗糖后搅拌使其溶化，用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0。加入14g琼脂，将铝锅置于电炉上,搅拌加热使琼脂完全溶化，然后用蒸馏水定容至终体积2L，继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中。
烟草叶片愈伤组织诱导取一无菌培养皿，用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿中，并用解剖刀将叶片切成2mm2左右的小片，然后将其接种于准备好的培养基上，每瓶接种5小片，一共接种6瓶。接种后的三角平置于24条件下黑暗培养1周，然后在同样温度下有光照和全黑暗下培养3周直至愈伤组织形成(两种情况各置3瓶)。观察愈伤组织诱导结果，统计愈伤组织诱导率。
器官分化及植株再生培养
将诱导的愈伤组织按类型分别转入分化培养基上,置于连续光照，温度20-22℃条件下培养3周，统计愈伤组织再生植株情况。
愈伤组织诱导的总体情况
烟草愈伤组织诱导培养4周后，愈伤组织基本形成，即排除因生长时间不够而未形成愈伤的情况。具体情况见表一中所示。6瓶培养物均有愈伤形成，且都未发生污染，但诱导率几乎各不相同。其中， 在光照条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为60.0℅，在黑暗条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为46.7%。由于实验过程中，外植体即烟草叶片取得偏小，接种时可能已有部分外植体的大部分细胞脱水死亡，使整个实验的愈伤组织诱导率偏低,愈伤块偏小。 RPMI1640培养基是一个全营养型培养基，广泛应用于哺乳动物细胞和杂交瘤细胞的培养，如人骨髓瘤细胞、鼠杂交瘤细胞、人白细胞以及B细胞和T细胞。最初设计用于悬浮细胞培养和人白血病细胞的单层细胞培养。
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时间：2023-10-25 06:32
牛肉膏琼脂培养基
牛肉膏0.3g ，蛋白胨1.0g，氯化钠0.5g，琼脂1.5g，水100ml
在烧杯内加水100ml，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2-7.6，分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌：1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15-30分钟。
牛心培养基
取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。
根瘤菌培养基
葡萄糖10g，磷酸氢二钾0.5g，碳酸钙3g，硫酸镁0.2g，酵母粉0.4琼脂20g，水1000ml，1%结晶紫溶液1ml。
先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。 淀粉*盐培养基（高氏一号培养基）
可溶性淀粉2.0g，*钾0.1g，磷酸氢二钾0.05g，氯化钠0.05g，硫酸镁0.05g，硫酸亚铁0.001g，琼脂2g，水100ml。
先把淀粉放在烧杯里，用5ml水调成糊状后，倒入95ml水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。在烧杯外做好记号，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水。调整pH值到7.2-7.4，分装后灭菌，备用。
面粉琼脂培养基
面粉60g，琼脂20g，水1000ml
把面粉用水调成糊状，加水到500ml，放在文火上煮30分钟。另取500ml水，放入琼脂，加热煮沸到溶解后，把两液调匀，补充水分，调整pH值到7.4，分装，灭菌，备用。 BG-11培养基
NaNO3 1.5g，K2HPO4 ·3H2O0.04g，MgSO4·7H2O0.075g，CaCl2 ·2H2O0.036g Citric Acid （柠檬酸 ）0.006g，Ferric ammonium citrate（柠檬酸铁铵0.006g，EDTA (dinatrium-salt) 0.001g，Na2CO3 0.02g，A5 + Co solution * （A5溶液1000×）1ml Distilled Water （蒸馏水）919ml
SE培养基 NaNO3 0.25g K2HPO4 . 3H2O 0.075g MgSO4 . 7H2O 0.075g CaCl2 . 2H2O 0.025g KH2PO4 0.175g NaCl 0.025 Soil extract 40ml FeCl3·6H2O 0.005 Fe—EDTA 1ml A5 solution 1000× 1ml distilled water 958ml Soil Extract(土壤提取液)配置方法
取花园土未施过肥0.5kg置于烧杯或三角瓶中，加入蒸馏水1000毫升，瓶口用透气塞封口，在水浴中沸水加热2小时，冷却数小时，在无菌条件下过滤，取上清液，将灭菌蒸馏水加入上清液至总体积1000毫升。土壤提取液保存在4ºC备用。
Composition of the A5 solution
Add to 100 ml of distilled water:（加入100ml 的蒸馏水） H3BO3 286 mg MnCl2 . 4H2O 181 mg ZnSO4 . 7H2O 22 mg CuSO4 . 5 H2O 7.9 mg (NH4）6Mo7O24 .4H2O 3.9 mg EDTA-Fe的配置方法：
将EDTA和FeCl3·6H2O分别溶于水和HCl(0.1N)，混匀即可。 Na2EDTA 1g distilled water 50ml FeCl3·6H2O 81 mg HCl（0.1N） 50ml Pr培养基
Preparation: to 997 mL of glass-distilled water, add 1.0 g proteose peptone, 15.0 g agar, and the following stock solutions: working solution g/1000 mL H2O NaNO3 0.25 CaCl2. 2H2O 0.025 MgSO4. 7H2O 0.075 K2HPO4 0.075 KH2PO4 0.175 NaCl 0.025 A5 solution 1ml EDTA-Fe 1ml FeCl3 (0.05%) 1ml A5溶液和EDTA-Fe溶液配制方法同上。 萨市（Sabouraud’s）培养基
蛋白胨10g，琼脂20g，麦芽糖40g，水1000ml
先把蛋白胨、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40g麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭菌，备用。
本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
马铃薯糖琼脂培养基
把马铃薯洗净去皮，取200g切成小块，加水1000ml，煮沸半小时后，补足水分。在滤液中加入10g琼脂，煮沸溶解后加糖20g（用于培养霉菌的加入蔗糖，用于培养酵母菌的加入葡萄糖），补足水分，分装，灭菌，备用。
把这培养基的pH值调到7.2-7.4，配方中的糖，如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。
豆芽汁培养基
黄豆芽100g，琼脂15g，葡萄糖20g，水1000ml
洗净黄豆芽，加水煮沸30分钟。用纱布过滤，滤液中加入琼脂，加热溶解后放入糖，搅拌使它溶解，补足水分到1000ml，分装，灭菌，备用。
把这培养基的pH值调到7.2-7.4，可用来培养细菌和放线菌。
豌豆琼脂培养基
豌豆80粒，琼脂5g，水200ml
取80粒干豌豆加水，煮沸1小时，用纱布过滤后，在滤液中加入琼脂，煮沸到溶解，分装，灭菌，备用。 马铃薯-蔗糖-琼脂培养基
20%马铃薯煮汁1000ml，蔗糖20g，琼脂18g
把马铃薯洗净去皮后，切成小块。称取马铃薯小块200g，加水1000ml，煮沸20分钟后，过滤。在滤汁中补足水分到1000ml，即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，补足水分，分装，灭菌，备用。使用该培养基对pH值要求不严格，可以不测定。
综合马铃薯培养基
20%马铃薯煮汁1000ml，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，葡萄糖20g，维生素10mg，琼脂18g
先配制20%马铃薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各种组分，加热溶解后补足水分，调整pH值到6。分装，灭菌，备用。 该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。 在植物组织培养时，通过调节IAA和CTK的比值能影响愈伤组织分化出根或芽。CTK/IAA高时，愈伤组织分化芽。
CTK/IAA低时，分化根；CTK/IAA比例适中维持愈伤组织不分化。
愈伤组织诱导培养基制备
以MS培养基母液为基础，向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ，维生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培养基后，再加入0.5mg·L-1的BA8mL，0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水，加入40g蔗糖后搅拌使其溶化，用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0。加入14g琼脂，将铝锅置于电炉上,搅拌加热使琼脂完全溶化，然后用蒸馏水定容至终体积2L，继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中。
烟草叶片愈伤组织诱导取一无菌培养皿，用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿中，并用解剖刀将叶片切成2mm2左右的小片，然后将其接种于准备好的培养基上，每瓶接种5小片，一共接种6瓶。接种后的三角平置于24条件下黑暗培养1周，然后在同样温度下有光照和全黑暗下培养3周直至愈伤组织形成(两种情况各置3瓶)。观察愈伤组织诱导结果，统计愈伤组织诱导率。
器官分化及植株再生培养
将诱导的愈伤组织按类型分别转入分化培养基上,置于连续光照，温度20-22℃条件下培养3周，统计愈伤组织再生植株情况。
愈伤组织诱导的总体情况
烟草愈伤组织诱导培养4周后，愈伤组织基本形成，即排除因生长时间不够而未形成愈伤的情况。具体情况见表一中所示。6瓶培养物均有愈伤形成，且都未发生污染，但诱导率几乎各不相同。其中， 在光照条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为60.0℅，在黑暗条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为46.7%。由于实验过程中，外植体即烟草叶片取得偏小，接种时可能已有部分外植体的大部分细胞脱水死亡，使整个实验的愈伤组织诱导率偏低,愈伤块偏小。 RPMI1640培养基是一个全营养型培养基，广泛应用于哺乳动物细胞和杂交瘤细胞的培养，如人骨髓瘤细胞、鼠杂交瘤细胞、人白细胞以及B细胞和T细胞。最初设计用于悬浮细胞培养和人白血病细胞的单层细胞培养。
