发布网友 发布时间:2022-04-25 00:39
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热心网友 时间:2023-10-18 00:11
逆转录反应的目的如下:
逆转录过程的揭示是分子生物学研究中的重大发现,是对中心法则的重要修正和补充。人们通过体外模拟该过程,以样本中提取的mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成出互补的cDNA,构建cDNA文库,并从中筛选特异的目的基因。
某些特定的病毒可以进行逆转录。它们携带的RNA无法被宿主细胞的生物合成系统识别,于是通过逆转录反应将自身携带的RNA逆转录成cDNA,然后就可以利用宿主细胞的生物合成系统合成自己需要的蛋白,从而产生自己的后代。
逆转录的原理:
逆转录具有较高的灵敏性、操作简单等优点,常用于基因定量分析、生物学检测等,此外常用逆转录PCR克隆目的基因。 本文主要讲述了逆转录PCR的原理、重要参数以及操作注意事项。
cDNA的合成是RT-PCR 的重要环节。以mRNA为模板,在逆转录酶的催化下,随机引物或基因特异性引物的引导下合成互补的DNA(complementary DNA,cDNA),再按照普通PCR的方法用两条引物以cDNA为模板,则可扩增出不含内含子的可编码完整基因的序列。