请问我的ELISA预实验该怎么实施?
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发布时间：2022-04-26 19:12
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时间：2023-10-23 00:10
酶标仪；
2. 确定实验动物种属和ELISA检测指标：
查找文献，根据临床意义，确定要用的实验动物种属（如大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、狗等）和用ELISA方法检测的实验指标（如白介素，生长因子，激素等）；
3. 确定要搜集的标本类型：
如血清、抗凝血浆、肺泡灌洗液、脑脊液、尿液、关节华液、组织匀浆、细胞培养上清液等；
4. 确定要收集的标本数量：
用以确认需要采购检测试剂盒的数量；
5. 确定标本的处理方法：
根据所采购的检测试剂盒说明书，确定不同类型标本的正确处理方法；
6. 确定要收集的标本体积；
合理分组，根据实验模型，确定要收集的标本体积；
7. 确定购买试剂盒的厂家和试剂盒类别：
根据适用于要检测的标本的相应规格的ELISA试剂盒的灵敏度、检测范围、价格和到货期等情况来确定检测试剂盒的品牌厂家和类别；
8. 确定要购买的试剂盒的规格和数量：
根据标本数量，确定要购买的试剂盒的规格和数量，同时了解试剂盒的整盒有效期和拆开包装後的有效期（各主要成分的开瓶有效期），降低实验风险；
9. 确认实验复孔：
为了增加结果的可靠性，对标准曲线和标本，要求做双复孔或者三复孔，就是同一份标本，平行做两次或者三次。如果本身试剂盒的稳定性好，而又不要求每个数据的绝对准确，主要目的是为了统计学意义的话，可以选择做双复孔或者是单孔。
10. 确定时间的合理安排：
最主要确定标本的采集时间，根据采集时间来安排标本的保存条件、何时进行试剂盒的购买、如何进行预实验的安排、如何进行大批量标本的检测：如果标本采集时间过长，如超过六个月，请把标本放在-70度或者液氮罐中保存；在基本上收集完标本的前一个月，进行试剂订购。一般国外试剂的到货期最长一个月，有足够的时间来等待试剂盒的来到。到货後，取几个样品（最少两个，估计的低值和高值）和标准品来进行预实验。预实验成功後才能进行大批量标本的实验。
注：因为每个试剂盒可能都经过长途运输，运输途中可能会导致试剂盒失效，所以预实验是必不可少的，这样才能保证试剂盒没有问题，而且一旦有问题可以快速得到解决，且不用浪费自己辛苦收集的标本。
