基因克隆载体需要有哪几个条件?

发布网友发布时间：2022-04-26 19:05

共3个回答

热心网友时间：2022-05-02 21:16

用人工方法取得目的基因的适宜载体，即质粒（一种环状双链DNA）或病毒。

基因克隆载体必须具备三个条件，具有能使外源DN*段插入的克隆位点；能携带外源DNA进入受体细胞，或游离在细胞质中进行自我复制，或整合到染色体DNA上随染色体DNA的复制而复制；必须具有选择标记，以便筛选承载外源DNA的受体细胞。

目前原核受体细胞的载体主要有细菌质粒（松弛型）和λ噬菌体两类，真核细胞受体的载体主要有SV40病毒（用于动物转化）和Ti质粒（用于植物转化）。

热心网友时间：2022-05-02 22:34

基因工程的上游工程主要是目的基因的制取和无性繁殖。具体地说是从生物体的组织、器官或细胞制取目的基因或者人工合成目的基因，将目的基因与载体的DNA拼接，使重组体分子导入受体细胞，筛选和进行无性繁殖。这个过程可以称为基因克隆(gene cloning)。基因克隆是70年代发展起来的一项具有*性的研究技术，可概括为∶分、切、连、转、选。最终目的在于通过相应技术手段，将目的基因导入寄主细胞，在宿主细胞内目的基因被大量的复制。
基因是细胞内DNA分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。基因控制蛋白质合成，是不同物种以及同一物种的不同个体表现出不同的性状的根本原因，即所谓"种瓜得瓜，种豆得豆"，"一母生九子，九子各不同"。基因通过DNA复制及细胞*把遗传信息传递给下一代，并通过控制蛋白质的合成使遗传信息得到表达。

“分”是指分离制备合格的待操作的DNA，包括作为运载体的DNA和欲克隆的目的DNA。"切"是指用序列特异的*性内切酶切开载体DNA，或者切出目的基因；"连"是指用DNA连接酶将目的DNA同载体DNA连接起来，形成重组的DNA分子；"转"是指通过特殊的方法将重组的DNA分子送入宿主细胞中进行复制和扩增；"选"则是从宿主群体中挑选出携带有重组DNA分子的个体。基因工程技术的两个最基本的特点是分子水平上的操作和细胞水平上的表达，而分子水平上的操作即是体外重组的过程，实际上是利用工具酶对DNA分子进行"外科手术"。

热心网友时间：2022-05-03 00:09

基因克隆载体的基本要求:
1.载体应该是一个独立的复制子，含有复制起点，可在细胞中进行自助复制。
2.含有若干*酶的单一切点，将该处切割后，即可插入外源DNA。
3.含有选择标记，便于将重组载体与原始载体区分开来。
4.载体应尽可能小，只保留必须序列，而删除其中的非必须序列。
5.具有一定的安全性，在胞内不发生重组与转移，在胞外不能自由扩散。