高中生物 基因重组 目的基因的检测与鉴定 利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无 利用分子杂交
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发布时间：2022-04-26 07:11
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热心网友
时间：2023-10-08 21:08
高中水平你知道基因是一段具有生物学功能的DNA序列就可以了，什么叫生物学功能呢？就是可以翻译成为具有功能的蛋白质，或者转录为具有功能的RNA（比如tRNA，功能就是携带氨基酸）
那么基因的本质是DNA（RNA病毒除外），即一段特定的DNA序列，比如ATTGGC……
检测有没有目的基因，你需要先知道 目的基因的序列，然后体外合成扩增或用其他手段获得这样一段特定的DNA序列的互补序列如上例就是5‘GCCAAT3’，然后将你需要检测的样本的DNA提取出来，在然后用你准备好的互补序列去和你的提取样本放在一起退火（意思是可以互补的单链DNA回复双链）你可以给你的探针上的磷用同位素标记，当你退火一段时间，冲洗样本，将没有配对的探针洗去，检测样本有没有磷同位素标记，如果有，说明探针和目的基因互补配对了，说明目的基因存在如果没有，说明不存在目的基因，就这样.
其实原理就是碱基互补配对。
检测目的基因的翻译，我想你要说的其实是转录吧！
我假设你要检测的翻译蛋白质的基因的转录，那转录物就是mRNA，高中的知识应该告诉你了，mRNA（真核）3‘端具有多聚A的尾巴，那么我用多聚T的探针（探针另一头我可以连接在一个固定物体上）去和细胞中的mRNA配对，然后将细胞内所有的mRNA都抽提出来（因为是AAAAAAA和TTTTTT配对，没有特异性，注意前面的探针是具有特异性的）这个时候，你有两种选择：1.用目的基因的探针直接和mRNA配对来检测 2.将mRNA逆转录会cDNA，然后在用探针检测
个人觉得2方案更好，因为逆转录以后可以PCR扩增，这样大量探针和大量的目的基因杂交，如果能配对，信号强易检测，置信度大。
就是这样，纯原创。追问非常感谢…
热心网友
时间：2023-10-08 21:09
谢谢了
热心网友
时间：2023-10-08 21:09
