发布网友 发布时间:2022-05-20 13:35
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热心网友 时间:2023-10-25 18:16
革兰氏染色中初染液和复染液不能颠倒使用。碘液要与结晶紫形成络合物,才能卡在革兰氏阳性细胞壁内。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:(1)载玻片固定。在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀,在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。(2)草酸铵结晶紫染1分钟。(3)自来水冲洗,去掉浮色。(4) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟,倾去多余溶液。(5)用中性脱色剂如乙醇(95%)或丙酮酸脱色30秒,革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。酒精脱色为整个流程最关键的一步。(6)用蕃红染液或者沙黄复染30秒,革兰氏阳性菌仍呈紫色,革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。