浓缩胶(积沉胶)和分离胶有什么区别?各自在电泳中的作用是什么?
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发布时间:2022-05-19 06:25
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热心网友
时间:2023-10-05 13:06
我的一点感受,浓缩胶和分离胶的PH值不同,前者主要表现为浓缩效用,后者表现为电荷效用和分子筛效用。
浓缩效应主要在浓缩胶中完成,浓缩胶的pH6.8,在这个pH条件下,缓冲液中的HCl的Cl离子几乎全部解离,Gly的等电点为6.0,仅少数解离为负离子,在电场中移动速度很慢。酸性蛋白质在此pH下解离为负离子,三类离子的迁移速率为Cl>一般蛋白质>Gly,电泳开始后,Cl离子泳动快,在其后留下一个低离子浓度区。Gly在电场中移动很慢,造成移动离子的缺乏,于是快慢离子间就形成了一个缺少离子的高压区,在高压区内所有的负离子都会加速移动,当移到Cl离子区域时,高电压消失,蛋白质的移动速度慢下来,当以上稳定状态建立后,蛋白质样品在快慢离子间被浓缩形成一个狭小的之间层,并按蛋白质所带负电荷量的多少依次排列成带,浓缩样品,从浓缩胶进入分离胶后,胶的pH升高,Gly的离解度增大,泳动率上升,又因为它分子小,故超过所有的蛋白质分子,紧跟在Cl离子后,Cl离子迁移后,低离子浓度不再存在,形成了恒定的电场强度,因此,蛋白质样品在分离胶中的分离主要取决于它的电荷性质,分子大小和形状,分离胶的孔径有一定大小,对不同相对质量的蛋白质来说,通过时收到的滞阻作用不同,即使静电荷相等的颗粒,也会由于这种分子筛的效应,把不同大小的蛋白质相互分开。
热心网友
时间:2023-10-05 13:06
区别:pH值(忘了那个pH大一点)不同;胶浓度不同,凝胶的孔径不同。(浓缩胶浓度小,孔径大)
作用:
浓缩胶:就是浓缩作用。有堆积作用,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带,提高电泳的灵敏度。
分离胶:就是分离,把样品中的不同组分分离开来。
热心网友
时间:2023-10-05 13:07
浓缩胶里完成完全SDS化、以及把一些大的离谱的东西去掉
分离胶就分离。。。