冰冻切片冰冻切片的制作方法
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发布时间：2024-10-09 12:16
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时间：2024-10-09 12:25
冰冻切片是生物医学研究中常用的样本处理方法，用于保存和观察组织结构。在低温环境下冷冻组织后，使用冰冻切片机将组织切成极薄的切片。以下是冰冻切片的制作方法，以Shandon As 620 E型恒温箱冷冻切片机为例。
该机具有多种功能，包括即时冷冻和除霜功能，照明功能，消毒功能以及锁住工作间的密锁键。操作者可以通过触摸屏进行温度调节，工作间温度范围为0-30℃，冷冻台温度可达-60℃左右。冷冻箱内的冷冻台和切片机是关键设备。
制作冰冻切片的步骤如下：
1. 取材时，组织不宜太大太厚，一般应为24×24×2mm，以确保冷冻和切片过程顺利进行。
2. 使用组织支承器固定组织，并在周边滴上包埋剂，迅速放入冷冻台上进行冰冻。对于较小的组织，应先形成一个小台，然后放上细小组织并滴上包埋剂。
3. 将冷冻好的组织块夹紧在切片机的持承器上，启动粗进退键进行初步修平。
4. 调整切片厚度，根据组织类型（细胞密集组织薄切，纤维多细胞稀组织稍厚切）设定厚度，一般在5～10um间。
5. 调整防卷板，确保切片在通过刀防卷板时平整附贴在持刀器上，然后取一载玻片附贴。
6. 冷冻箱中的温度根据组织类型调整，如脑组织、肝组织、淋巴结在-10- -15℃，甲状腺、脾、肾、肌肉等在-15～20℃，带脂肪组织在-25℃，含大量脂肪在-30℃。
冰冻切片过程中的注意事项包括保持防卷板、切片刀和持刀架板块的清洁，防止残留的包埋剂破坏切片；组织应根据形状和走势正确放置；使用未完全固定的组织进行冰冻切片，需注意冰晶形成；切片时冰冻过度，可以适当软化组织；用于附贴切片的载玻片需室温存放。
冰冻切片后，立即放入恒冷箱中的固定液固定1分钟后即可染色。快速染色法步骤包括切片固定、水洗、苏木素染色、分化、返蓝、伊红染色、脱水、透明和封固。整个快速制片过程在10分钟内完成，与石蜡切片结果相似。
冰冻切片技术还有多种方法，如甲醇循环的半导体冰冻切片法、二氧化碳冰冻切片法、半导体冰冻切片法和氯乙烷冰冻切片法等。这些方法虽然较少使用，但它们在特定条件下仍有其独特优势。
冰冻切片冰冻切片的制作方法
制作冰冻切片的步骤如下：1. 取材时，组织不宜太大太厚，一般应为24×24×2mm，以确保冷冻和切片过程顺利进行。2. 使用组织支承器固定组织，并在周边滴上包埋剂，迅速放入冷冻台上进行冰冻。对于较小的组织，应先形成一个小台，然后放上细小组织并滴上包埋剂。3. 将冷冻好的组织块夹紧在切片机的持...
切片机哪家好？
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冰冻切片的冰冻切片的制作方法
③将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。④调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5～10um间。⑤调好防卷板。制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求操作者要细心，准确地将其调较好，...
冰冻切片的制作步骤及每个步骤的要求和作用?
1. 取出组织支承器，平放组织样本，周边滴上包埋剂，迅速放置于冷冻台上冰冻。用吸热器压住组织，待包埋剂与组织冻结成白色冰体后即可进行切片，这个过程通常需要1到3分钟。2. 将冷冻好的组织块夹紧在切片机持承器上，启动粗进退键，调整旋钮以修平组织。3. 设定所需的切片厚度，根据不同组织类型进行...
快速冰冻切片制作方法及经验?
1取新鲜组织于4%多聚甲醛固定24小时 230%蔗糖脱水48小时以上 3-250C包埋（冰冻切片机内）4冰冻切片 冰冻切片步骤 冰冻切片免疫组化染色步骤：冰冻切片4~8μm，室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定10分钟，PBS洗，5分钟×3次。用3%过氧化氢孵育5~10分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗，5...
冰冻切片法详细步骤
3. 恒冷箱冰冻切片 冰冻切片有多种方法，如CO2 制冷冰冻切片、半导体制冷切片以及恒冷箱冰冻切片。恒冷箱冰冻切片机(cryostat) 为较理想的冰冻切片机。要获得薄的、无人工假象的切片应注意以下几个方面：a.制备新鲜组织时，骤冷愈快愈好，避免冰晶产生；b.制备经固定剂固定的组织时，为防止水解酶和其他...
冰冻切片制作方法与注意事项
冰冻切片制作方法与注意事项一、固定：固定即借助化学试剂是组织和细胞中的有机和无机成分凝固或沉淀，停止发生死后组织变化，尽量保持其活体状态的过程。固定的方法有浸泡固定法，注射、灌注固定法，蒸汽固定法，本实验用的是注射、关注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难流入内部或需要对整个脏器...
制作切片时包埋的目的是什么
冰冻切片制作过程 1、组织固定：新鲜组织固定液固定24h以上，将组织从固定液取出用手术刀将目的部位组织修平整。2、脱水：将修切好的组织放于15%的蔗糖溶液内4℃冰箱脱水沉底后转入30%的蔗糖溶液内4℃冰箱脱水沉底。3、OCT包埋：将脱好水的组织取出用滤纸将表面水稍吸干后切面朝上放于包埋台上，组织...
冰冻切片技术的目的及制作方法
二、冰冻切片制作的艺术与科学要实现精准的冰冻切片，首要步骤是选择适宜的冷冻方法。恒温冷冻切片机是目前最常用的技术，通过将样本和切片机密封在恒冷箱中，确保稳定的低温环境，操作简便而精确。冷冻前，设备需调整至理想的切片温度，通常在-25°C至-15°C之间。1. 取材艺术取材时，应保持组织的新鲜和...
怎么切好冰冻切片?
冰冻组织的取材，就是选择好合适的组织块，放在一个小的金属托上进行速冻，冻到一定的硬度后，就在病理切片机进行切片。然后将切片放入酒精或者专有的固定液里固定，最后进行相应的染色及封片。再盖上盖玻片，贴上病理号标签，这样一张冰冻切片就制作完成了。
浅谈怎么切好冰冻切片(转载自丁香园)
组织块不经任何包埋剂而直接放在制冷台上冷却后再进行切片。1．恒冷箱切片就是将组织在恒冷箱的切片机切片。目前恒冷箱切片机的品种较多。此种切片适用于科研和教学上的连续切片。要求预先开动电源（预冷准备），配多种固定组织台，以便更换组织。2．甲醇制冷器制冷箱为附有带导管的制冷台和制冷刀的甲醇...
