微生物菌种冷冻干燥保藏技术
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发布时间:2024-10-05 00:40
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热心网友
时间:2024-10-21 11:52
微生物菌种的冷冻干燥保藏技术是一种广泛应用的长期保存方法,尤其适合细菌、放线菌、病毒、噬菌体等,但对藻类和原虫不太适用。以下是其主要步骤的概述:
首先,选择适合的冷冻干燥管,如耐温、耐压的中性玻璃安瓿管,需经过盐酸浸泡、清洗和灭菌等步骤。接着,根据菌种特性选择并配制保护剂,如常用的15%脱脂乳。
在分装阶段,需在无菌环境下操作,将约0.1-0.2 mL菌液均匀滴入安瓿管底部,注意避免上部污染。预冻后,将样本放入冷冻干燥机进行冷冻干燥,过程需控制温度和真空条件。干燥完成后,使用喷射火焰熔封安瓿管口,确保真空状态。
质量检查是关键环节,通常在封口后1 d、7 d、30 d进行生存率、性能等测试。复苏步骤包括擦拭安瓿管、烧热顶部、敲下菌块并溶解在无菌溶液中,再移入新鲜培养基培养。
总的来说,冷冻干燥保藏技术通过精确的步骤确保微生物菌种的长期稳定保存,但在实际操作中需严格遵循各项要求。
热心网友
时间:2024-10-21 11:53
微生物菌种的冷冻干燥保藏技术是一种广泛应用的长期保存方法,尤其适合细菌、放线菌、病毒、噬菌体等,但对藻类和原虫不太适用。以下是其主要步骤的概述:
首先,选择适合的冷冻干燥管,如耐温、耐压的中性玻璃安瓿管,需经过盐酸浸泡、清洗和灭菌等步骤。接着,根据菌种特性选择并配制保护剂,如常用的15%脱脂乳。
在分装阶段,需在无菌环境下操作,将约0.1-0.2 mL菌液均匀滴入安瓿管底部,注意避免上部污染。预冻后,将样本放入冷冻干燥机进行冷冻干燥,过程需控制温度和真空条件。干燥完成后,使用喷射火焰熔封安瓿管口,确保真空状态。
质量检查是关键环节,通常在封口后1 d、7 d、30 d进行生存率、性能等测试。复苏步骤包括擦拭安瓿管、烧热顶部、敲下菌块并溶解在无菌溶液中,再移入新鲜培养基培养。
总的来说,冷冻干燥保藏技术通过精确的步骤确保微生物菌种的长期稳定保存,但在实际操作中需严格遵循各项要求。