慢病毒疑难解答合集-MOI/感染最佳时间/感染效率/荧光强度

发布网友发布时间：2024-10-05 13:07

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热心网友时间：2024-10-31 10:17

慢病毒载体，以HIV-1为基础，因其高效基因整合和感染能力，被广泛用于基因治疗。然而，使用过程中可能遇到一些问题，如MOI计算、最佳感染时间、细胞接种量控制等。首先，MOI（感染复数）是衡量细胞感染病毒的数量，可通过细胞被感染比例和病毒滴度计算。最佳感染时间应在细胞汇合度30%-50%且状态良好时进行，通常在感染后2天细胞生长达到70%左右。细胞接种量需根据细胞增殖速度调整，确保3天后细胞填满培养皿底部，原代细胞接种时汇合度可适当提高。

慢病毒感染后，荧光表达通常在3天左右达到峰值，但具体时间取决于细胞类型。如果荧光弱，可能是因为病毒颗粒数、启动子活性、观察时间等因素。过表达的慢病毒荧光较暗，可能因载体容量*、插入基因长度影响、病毒纯度和对照病毒的差异。曝光时间长未观察到荧光，可能是显微镜问题、pH值过低或目的病毒荧光强度较低。汉恒生物致力于提供优质的慢病毒产品，确保无支原体污染和一致的纯化工艺，以帮助科研工作者解决这些问题。