如何配置胰酶+EDTA消化液

2．称取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中(夏天时研磨器应放在冰浴中)，加入少量D－Hanks液研磨1 000次左右，调制成糊状。再放入4℃预冷的适量D-Hanks液中，4℃下磁力搅拌使完全溶解。3．用NaHC03干粉将胰酶溶液的pH值调至8.0左右(胰酶作用的最适pH值)，并加入0.02％EDTA以协助消化作用。4．滤过...

配制0.67%硫代巴比妥酸溶液，首先需准确称取硫代巴比妥酸，其质量应为溶液总体积乘以所需浓度（即0.67%），假设配制100mL溶液，则需称取约0.67g硫代巴比妥酸。随后，将称取的硫代巴比妥酸加入适量的蒸馏水中，边搅拌边溶解，直至完全溶解无沉淀...

1、贴壁细胞的消化：（1）吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。（2）加入少量胰蛋白酶消化液，盖过细胞即可，室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。（3）显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者...

胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，比较胰酶的活性，EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，如果胰酶中加有EDTA，就要离心，细胞就不会浪费掉。河南省干细胞库为您解答，希望能解决您的疑问。

适宜消化液: 0.125％胰酶，加或不加EDTA。 EDTA浓度一般为0.2％，用磷酸盐生理盐水配制。有时候室温消化5～10min即可，有时候需要在37度消化20min。(可能与细胞状态和消化液活性有关)培养基：含10～12％新生牛血清的MEM。1640也生长良好。一般2～3天长成单层，接种量大长成单层快。

看要做检测细胞表面标记尽量要使用胰酶消化否则能破坏表面构象导致假阴性类情况使用弹性酶胶原酶等短间消化或者单独使用EDTA

1m mol/L 0.33621g/L 可以拿母液稀释成这个浓度

单纯用EDTA也能消化细胞？ 第一次听说，能给个配方吗~~~我知道胰酶可以消化细胞，EDTA只是起螯合作用吧，0.25%的胰酶消化液消化普通细胞大约3-5分钟，不同细胞消化时间不一样，这得看你是什么细胞，快的2——3分钟，慢的10-20分 。还有消化液的浓度 ...

3.将培养基,胰酶/EDTA消化液,胰酶中和液和DPBS(磷酸盐缓冲液) 加热至室温。我们不推荐在使用前用37°C水浴加热试剂和培养基。4.用DPBS冲洗细胞。5.用10 ml胰酶/EDTA消化液消化细胞(以T-75培养瓶为例),直到80%细胞呈现圆形(在显微镜下观察)。立刻加入10 ml 胰酶中和液并轻轻摇动培养瓶。注意:应用ScienCell...

培养特点值得注意：MCF-7生长缓慢，初次观察可能需要6-12天达到80%密度。若生长慢于预期，尝试更换更高浓度（20%）的血清。复苏和传代后，细胞可能出现团状漂浮，前三天可不处理，随后需要离心回收并分散到新的培养瓶。消化细胞时，使用BC-CE-005胰酶-EDTA消化液，注意温和操作以防止细胞团形成。在细胞...

如果含有EDTA，是应该去除胰酶的。操作步骤应该是加入培液终止消化反应，轻轻吹打细胞，转入离心管，离心，去上清，再用培液悬浮细胞，分装到培养瓶中。