LDH-L测定方法
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发布时间：2024-07-22 08:52
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时间：2024-08-09 00:47
以下是LDH-L测定方法的详细步骤:
1. 试剂准备:
若使用双试剂盒，无需额外配制，可以直接使用。若为单试剂操作，需将R1与R2按照4:1的比例混合，制成工作液。
2. 基本参数:
测定方式:速率法
样品量:5微升
延迟时间:60秒
R1:200微升, 主波长340纳米, 光径1厘米
R2:50微升, 副波长405纳米
F值:在1厘米光径下的值为8199
3. 测定步骤:
半自动/全自动测定>
将R1和R2按4:1比例配制工作液，调整至37℃。
加入样本和空白管:
空白管:20微升DH2O
测定管:样本或标本20微升, 工作液1毫升
混匀后，37℃下延迟60秒，测定60秒，记录△A/分。
加入物:空白管5微升, 标本5微升, R1和R2各200微升
混匀, 37℃恒温1-5分钟，然后延迟60秒测定，记录△A/分。
4. 结果计算:
LDH-L(U/L)= △A/分×F / (Vs×ε×L)
其中:
Vt: 反应液总体积(微升)
Vs: 样本体积(微升)
L: 比色杯光径(厘米)
ε: NADH在340纳米处的吸光系数, 为6.22
公式变为: LDH-L(U/L)= △A/分×8199 / (37℃)
5. 试剂性能:
线性范围:0-1600U/L
精密度:批内批间差CV分别为≤4.7%和≤5.9%
准确度:与国际公认的质控血清相符
空白吸光度:小于0.600A
注意事项:
根据仪器要求调整样本和试剂用量。
工作液空白吸光度大于0.600A时，不可使用。
建议每次实验做空白管校正。
非1厘米光径时，F值需按实际光径调整。
参考值范围:114-240U/L，建议各实验室根据自身条件建立专属参考范围。
扩展资料
LDH-L:乳酸脱氢酶测定试剂，这种药剂适用于人血清或血浆中乳酸脱氢酶的体外定量分析。
