免疫卫士——T细胞培养攻略
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发布时间:2024-08-20 17:24
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热心网友
时间:2024-09-04 14:59
T细胞作为免疫系统的核心组件,承担着适应性免疫的重要职责,在细胞免疫和体液免疫中发挥关键作用。随着基于T细胞的三大免疫疗法如CAR-T、TCRT、TILs的快速发展,全球对T细胞研究和应用的热情持续升温。目前,FDA已批准了6款CAR-T产品,中国也上市了5款CAR-T产品,全球共有11款CAR-T产品获准上市。2024年2月16日,全球首款TIL疗法lifileucel(LN-144)获得批准,用于晚期黑色素瘤治疗,这标志着在实体瘤治疗领域又迎来了新的里程碑。
类器官与T细胞的共培养技术成为研究热点。通过将T细胞与肿瘤类器官共培养,不仅可为优化个性化实体瘤靶向细胞疗法提供支持,还能基于类器官免疫共培养技术筛选改善肿瘤免疫原性的表观遗传调节药物。这揭示了T细胞在实体瘤治疗中的潜力。
要实现T细胞的有效体外培养和应用,需从多个方面着手。首先,T细胞来源多样,可从捐献者血液或实体组织样本中获取,通过样本制备、细胞分选等手段获得高纯度、高活性的T细胞。自体或同种异体供体的原代T细胞常用于癌症治疗,确保安全性和有效性。推荐使用的T细胞培养基、血清、细胞处理工具和试剂等产品。
培养过程中,需选择合适的培养体系,经典培养基如RPMI-1640配合适量血清或无血清培养基,确保T细胞的稳定生长。培养条件包括37°C温度、5% CO2浓度以及防止污染,使用青霉素-链霉素溶液、支原体检测试剂盒、动态显色法内毒素检测试剂等产品,确保培养环境的安全性。
激活T细胞是培养过程的关键步骤,自然激活过程需要TCR与抗原肽-MHC分子复合物的相互作用,以及共刺激信号如CD28与B7分子的结合。在体外,可通过使用抗CD3和CD28抗体模拟激活信号,或采用磁珠法高效激活T细胞。在激活阶段,推荐的抗体、磁珠产品以及操作步骤确保了T细胞的高效激活。
随着T细胞的扩增,需添加细胞因子如IL-2或IL-7/IL-15以支持T细胞的扩增和存活。推荐的细胞因子产品与方案能够有效支持T细胞的扩增过程。在维持T细胞活力方面,需避免培养密度过高、确保培养体系营养充足、无菌环境,使用推荐的冻存液和冻存袋产品以确保T细胞在储存过程中的活力。
T细胞功能检测包括细胞毒性试验、ELISpot检测、流式细胞术等,这些方法能够评估T细胞的表型、功能和活力,确保T细胞的治疗潜力。推荐的检测方案与试剂产品为功能检测提供了便利。
热门研究方向如肿瘤类器官与T细胞的共培养系统,通过激活和刺激T细胞与类器官相互作用,研究T细胞在肿瘤免疫中的作用,为肿瘤治疗提供新的策略。推荐的类器官培养试剂盒与免疫细胞冻存产品在研究中发挥关键作用。
综上所述,T细胞的体外培养与应用涉及从T细胞来源、培养、激活、扩增、活力维持、功能检测到热门研究方向的多个步骤,每一步都需精心设计和执行,以实现T细胞在免疫治疗中的高效应用。随着研究的不断深入和技术的持续进步,T细胞在免疫治疗领域的潜力将持续释放。
热心网友
时间:2024-09-04 15:02
T细胞作为免疫系统的核心组件,承担着适应性免疫的重要职责,在细胞免疫和体液免疫中发挥关键作用。随着基于T细胞的三大免疫疗法如CAR-T、TCRT、TILs的快速发展,全球对T细胞研究和应用的热情持续升温。目前,FDA已批准了6款CAR-T产品,中国也上市了5款CAR-T产品,全球共有11款CAR-T产品获准上市。2024年2月16日,全球首款TIL疗法lifileucel(LN-144)获得批准,用于晚期黑色素瘤治疗,这标志着在实体瘤治疗领域又迎来了新的里程碑。
类器官与T细胞的共培养技术成为研究热点。通过将T细胞与肿瘤类器官共培养,不仅可为优化个性化实体瘤靶向细胞疗法提供支持,还能基于类器官免疫共培养技术筛选改善肿瘤免疫原性的表观遗传调节药物。这揭示了T细胞在实体瘤治疗中的潜力。
要实现T细胞的有效体外培养和应用,需从多个方面着手。首先,T细胞来源多样,可从捐献者血液或实体组织样本中获取,通过样本制备、细胞分选等手段获得高纯度、高活性的T细胞。自体或同种异体供体的原代T细胞常用于癌症治疗,确保安全性和有效性。推荐使用的T细胞培养基、血清、细胞处理工具和试剂等产品。
培养过程中,需选择合适的培养体系,经典培养基如RPMI-1640配合适量血清或无血清培养基,确保T细胞的稳定生长。培养条件包括37°C温度、5% CO2浓度以及防止污染,使用青霉素-链霉素溶液、支原体检测试剂盒、动态显色法内毒素检测试剂等产品,确保培养环境的安全性。
激活T细胞是培养过程的关键步骤,自然激活过程需要TCR与抗原肽-MHC分子复合物的相互作用,以及共刺激信号如CD28与B7分子的结合。在体外,可通过使用抗CD3和CD28抗体模拟激活信号,或采用磁珠法高效激活T细胞。在激活阶段,推荐的抗体、磁珠产品以及操作步骤确保了T细胞的高效激活。
随着T细胞的扩增,需添加细胞因子如IL-2或IL-7/IL-15以支持T细胞的扩增和存活。推荐的细胞因子产品与方案能够有效支持T细胞的扩增过程。在维持T细胞活力方面,需避免培养密度过高、确保培养体系营养充足、无菌环境,使用推荐的冻存液和冻存袋产品以确保T细胞在储存过程中的活力。
T细胞功能检测包括细胞毒性试验、ELISpot检测、流式细胞术等,这些方法能够评估T细胞的表型、功能和活力,确保T细胞的治疗潜力。推荐的检测方案与试剂产品为功能检测提供了便利。
热门研究方向如肿瘤类器官与T细胞的共培养系统,通过激活和刺激T细胞与类器官相互作用,研究T细胞在肿瘤免疫中的作用,为肿瘤治疗提供新的策略。推荐的类器官培养试剂盒与免疫细胞冻存产品在研究中发挥关键作用。
综上所述,T细胞的体外培养与应用涉及从T细胞来源、培养、激活、扩增、活力维持、功能检测到热门研究方向的多个步骤,每一步都需精心设计和执行,以实现T细胞在免疫治疗中的高效应用。随着研究的不断深入和技术的持续进步,T细胞在免疫治疗领域的潜力将持续释放。