支原体污染的细胞状态和解决办法
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发布时间：2024-09-26 19:32
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时间：2024-10-26 17:56
支原体污染现象
支原体，直径微小（0.1-0.3 微米），其变形能力使其能穿透常规过滤器（0.22-0.45 微米），这意味着它们通常无法通过标准无菌过滤程序去除。抗生素对此类微生物通常无效。即使在培养条件稳定且表面没有明显污染迹象（如浑浊或pH变化），细胞生长缓慢、状态变差和细胞边界模糊可能预示支原体的存在。细胞在新培养液中未见明显恢复，且可能出现拉丝或铺展的异常形态。
值得注意的是，当细胞生长状态持续恶化，但培养基仍保持清澈，且无明显变化时，通常可判断为支原体污染。长时间观察（一周以上）无明显变化时，这样的判断更为准确。
面对支原体污染，有多种解决方案：
对于非关键细胞，可直接弃弃污染培养物和培养基。
使用MRA处理，浓度为25微克/毫升，两周内可清除支原体。
采用清洗纯化法，包括细胞营养驯化、筛选纯化群、洗涤离心，通过离心力和微生物的浮力差异来清除。
药物辅助加温，41℃下培养18小时，虽可杀死支原体但可能对细胞造成损害。
特异性血清疗法，5%兔免疫血清可抑制支原体，11天转阴性且持续5个月。
动物体内接种法，将污染细胞接种到动物体内，借助免疫系统消灭支原体。
巨噬细胞吞噬法，使用纯化后的巨噬细胞与污染细胞一起培养，通过逐日观察确认清除。
使用支原体清除培养基，定期更换并洗涤细胞，15天后检测，如有残留，再处理6天。
长期监控，每1个月进行支原体检测，确保无新污染。
通过这些方法，可以有效地应对和清除支原体污染，保护细胞培养的健康状态。
