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单克隆抗体制备详细步骤

发布网友 发布时间:2024-10-18 23:33

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热心网友 时间:2024-11-02 02:11

单克隆抗体的生产技术自1975年Köhler和Milstein的开创性工作后,已成为生命科学研究和药物开发的重要工具。预计到2023年,单抗药物市场将达到2189.7亿美元。单克隆抗体分为线性表位和结构识别两种,后者应用广泛于免疫沉淀、免疫染色等领域。

生产过程包括免疫小鼠、制备佐剂、免疫接种和血清效价检测。弗氏佐剂和水溶性佐剂被用于增强免疫反应,常用的实验材料有Balb/c雌鼠和SP2/0骨髓瘤细胞。免疫小鼠后,取脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合,形成具有稳定分泌特异性抗体能力的杂交瘤细胞。

杂交瘤细胞的克隆化至关重要,通过有限稀释法筛选出遗传稳定且高表达抗体的细胞。抗体亚型鉴定和腹水制备则进一步确定抗体的特性和适合的生产方式。大量生产单克隆抗体的方法包括细胞培养上清、皮下接种或腹腔注射。博奥龙公司作为一家专业生化试剂企业,提供全套单抗制备产品和相关技术服务。
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