园艺植物哪些组织器官可以作为组织培养的材料
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发布时间:2022-05-29 06:42
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时间:2023-10-09 19:01
以配置1L MS培养基为例,按顺序进行如下操作:
1.先在烧杯中放入一些蒸馏水。
2.分别取上面八种母液10ml倒入。
3.一般称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解。
4.加蒸馏水用量筒定溶至1L。
5.按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取,减少误差。
6.用精密试纸或酸度计调整PH至5.7~5.8。(有条件的话使用酸度计,比较精确) 可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值。
1当量HCL配制:用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。
1当量NaOH配制:称取NaOH 4g 配成100ml溶液。
7.称取5g左右琼脂粉(质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化。
8.稍微冷却后,分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧。
9.放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右。
10.灭菌后从灭菌锅中取出培养基,平放在实验台上令其冷却凝固。 灭菌是组织培养重要的工作之一。初学者要清楚有菌和无菌的范畴。有菌的范畴是:凡是暴露在空气中的物体,接触自然水源的物体,至少它的表面都是有菌的。依此观点,无菌室等未处理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表,如整个消化道、呼吸道,即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的。