为什么制备大肠杆菌感受态细胞冰浴

发布网友发布时间：2022-05-29 17:56

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热心网友时间：2023-10-30 23:56

冰浴过程中，原来加在溶液中的钙离子和细菌细胞膜结合，在低温下形成液晶结构，这样，在42度热激下，这种液晶结构收缩，将细胞膜扯开孔道，使DNA进入细菌细胞中。这就是原理。前面冰浴不清楚，热激我认为是让已经有孔的大肠杆菌孔膨胀，增加DNA进入的几率，然后立刻冰浴，使孔收缩，进去的DNA不要出来。个人想法，没看到过类似文献。你在NCBI上查查第一个利用大肠杆菌转化的人，他是怎么做的。

热心网友时间：2023-10-30 23:57

①在0℃的CaCl2低渗溶液中，细菌细胞发生膨胀，同时CaCl2使细胞膜磷脂层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，诱导大肠杆菌形成感受态
②Ca2+能与加入的DNA分子结合，形成抗DNA酶（DNase）的羟基-磷酸钙复合物，并黏附在细菌细胞膜的外表面上。当42℃热刺激短暂处理细菌细胞时，细胞膜的液晶结构发生剧烈扰动，并随之出现许多间隙，为DNA分子提供了进入细胞的通道。
内容来自百度文库

热心网友时间：2023-10-30 23:57

因为你在加入钙离子之后，细胞很脆弱，需要低温，这样可以保护它。